1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
2,4-d(2,4-dichlorophenoxyaceticacid)，化学名称为2,4-二氯苯氧乙酸，是一种常见的卤代芳烃类除草剂，是世界上最广泛使用的除草剂之一，全球销售额位列草甘膦和百草枯之后，是北美第三最常用的除草剂。
2,4-d是具有代表性的合成植物生长素的物质，同时也是一种常用的除草剂，在农林业中发挥了重大作用，尤其在水果（如柑橘）保鲜中应用广泛，但其毒性问题也受到广泛关注。2,4-d降解缓慢，而且吸附性强，所以极易在土壤中残留。作为一种卤代苯，其卤素原子及难被脱去，利用化学或者物理方法，很难完全矿化分解完全。而且卤代苯的矿化是一个多步的过程，中间的代谢产物可能存在更大的毒性。曾作为用于研究微生物降解氯代芳香化合物的模型化合物。
2,4-d会引发包括肌萎缩侧索硬化症和非霍奇金淋巴瘤等很多难治之证[1]，甚至还很可能引起很多男性的生殖问题，造成精子的畸形甚至死亡[2]。世界上曾经很多次发生2,4-d的急性中毒事故，加上其残留的慢性毒性问题，2,4-d造成的环境污染的修复是科研工作者关注的热点也是难点。
2. 研究的基本内容和问题
1 研究目标
本项目将在分离筛选到的一株除草剂2,4-d的降解菌achromobacterdenitrificanslz35的基础之上，通过2,4-d降解过程中的代谢产物分析，研究菌株lz35的2,4-d降解途径。并对菌株lz35进行全基因组测序，从而结合基因组寻找参与降解2,4-d的关键酶基因，并进行功能验证，阐明菌株lz35降解2,4-d的分子机制。
2 研究内容
3. 研究的方法与方案
1 研究方法
1.1降解效果的检测
配制培养基100ml于250ml三角瓶中，并灭菌。将保存的菌株划线置lb平板活化，活化好后接单菌于3mllb试管中培养过夜，最后按照5%的接种量接种于加药的无机盐培养基。30℃，150rpmin摇床培养。由于2,4-d具有很高的水溶性，所以将经过降解处理的无机盐液体培养液，以新鲜配制的无机盐培养液扫描基线，直接在uv-2450pc型分光光度计上于200～350nm段进行紫外扫描。
4. 研究创新点
AchromobacterdenitrificansLZ35为本实验室新分离出的菌株。通过前期的各种工作研究，其降解2,4-D的途径也很可能是一种新的降解途径
5. 研究计划与进展
时间进度 | 主要研究内容安排 | 完成技术指标或预期结果 |
2015年12月 | LZ35的基因组全测序 | 测得完整的LZ35的基因组序列 |
2016年1月2016年3月 | 2,4-D微生物降解途径的研究 | 通过代谢产物分析，研究出2,,4-D的微生物降解途径 |
2016年4月 | 降解菌株中降解关键酶的初步定义，酶促反应体系的建立，粗酶液的基本特性及其初步纯化 | 找到关键酶，建立完整的酶促反应体系，得到纯化的酶液 |
2016年5月 | 降解菌株中降解关键酶基因保守性的验证、降解关键酶基因的克隆与表达。 | 成功验证功能 |
2016年6月 | 论文结题报告撰写 | 发表论文一篇 |
