1. 研究目的与意义
经磷酸缓冲液浸提法提取出抑菌粗蛋白，通过离子交换层析及凝胶过滤层析对粗蛋白进行纯化，通过洗脱液pH的筛选及洗脱液离子强度的筛选确定纯化参数，将纯化出的抑菌蛋白采用牛津杯法检测其对常见细菌及霉菌的抑菌性，观察抑菌圈大小
2. 国内外研究现状分析
目前，国内外学者对银杏蛋白的研究主要集中在生物活性及药用机理方面，对银杏蛋白的抑菌、抗氧化、抗衰老和免疫调节等活性进行了研究。
3. 研究的基本内容与计划
1.研究内容 1.1银杏蛋白分离纯化方法 取30g已脱脂的白果粉，分别加入120ml浓度为0.05mol/L的磷酸缓冲液（pH7.0，含适量KCL和EDTA）进行提取，放于4℃冰箱中分别浸提不同时间，在4℃、10000r/min的条件下离心10min，取上清液测定白果蛋白质的含量。并对提取所得蛋白进行硫酸铵分级沉淀、离心，透析得到粗蛋白。 取样品10ml经CM-52离子交换柱层析和SephadexG-50凝胶过滤层析后分离纯化，通过SDS-PAGE分析结果取得抑菌蛋白。 1.2银杏种仁蛋白的抑菌活性检测 以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌、绿脓假单胞菌、青霉菌、曲霉菌等各种引起食品腐败变质菌及食源性致病菌为供试菌，采用牛津杯法进行抑菌活性检测，将已灭菌的琼脂培养基加热到完全融化，倒在培养皿内，每皿15ml（下层），待其凝固。此外，将融化的马铃薯葡萄糖琼脂培养基冷却到50℃左右混入试验菌，将混有菌的培养基5ml加到已凝固的培养基上待凝固（上层），根据抑菌圈直径的大小来分析银杏蛋白的抑菌活性。 2.研究计划 第一阶段12周（12.10-12.24）：查阅资料，确定测定方法 第二阶段26周（12.24-1.22）：磷酸缓冲液法对银杏蛋白进行提取 第三阶段611周（2.25-4.1）：粗蛋白进行纯化，CM-52离子交换柱层析和SephadexG-50凝胶过滤层析后分离纯化抑菌蛋白 第四阶段1216周（4.1-5.1）：银杏种仁蛋白的抑菌活性研究 第五阶段1618周（5.1-5.13）：结果分析、毕业论文撰写、答辩 |
4. 研究创新点
通过磷酸缓冲液法对银杏种仁中的蛋白进行提取，，选取最佳工艺进行纯化，采用牛津杯法对银杏种仁蛋白的抑菌活性进行研究，得出提取银杏蛋白的最适方法。为银杏的深加工提供一定的理论指导，提高银杏产业的经济效益。
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