1. 研究目的与意义
1、目的在已经构建产淀粉蔗糖酶的重组大肠杆菌的基础上,通过对摇瓶发酵条件进行单因素优化,再采用正交试验获得一种优化的培养基配方及发酵条件,建立一种高效制备淀粉蔗糖酶的发酵生产工艺。
在此基础上,优化将重组酶转化条件,获得高效制备目标产物的转化工艺。
2、意义:淀粉蔗糖酶(amylosucrase)是一种新型葡萄糖基转移酶,属于糖苷水解酶家族13,是该家族中唯一一种具有聚合作用的酶。
2. 国内外研究现状分析
1946年由hehre andhamilton首次在深黄奈瑟氏球菌(neisseria perflava)中发现,1948年由edward j.hehre等人从健康人体的喉咙中分离出该菌株。
随后,riou j.y,guibourdenche m. and popoff m.y从欧洲和非洲健康小孩的喉咙中也分离出neisseria polysaccharea,并证实该菌可以产生胞外淀粉蔗糖酶。
目前报道产生淀粉蔗糖酶的菌株有deinococcus radiodurans、caulobacter crescentus、xanthomonas campestris、xanthomonas axonopodis、pirellula sp。
3. 研究的基本内容与计划
1、内容:本研究在实验室前期已经构建产淀粉蔗糖酶的重组大肠杆菌的基础上,通过对摇瓶发酵条件进行单因素优化,再采用正交试验获得一种优化的培养基配方及发酵条件,建立一种高效制备淀粉蔗糖酶的发酵生产工艺。
在此基础上,优化将重组酶转化条件,获得高效制备目标产物的转化工艺。
2、计划:(1)多糖奈瑟球菌摇瓶水平产酶条件的优化研究。
4. 研究创新点
本项目的开展,有望获得一种高产淀粉蔗糖酶的重组菌的高效发酵制备工艺及其应用转化工艺,本项目的开展将为该酶的进一步开发提供参考。
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