不同松针中聚戊烯醇含量的HPLC测定开题报告

1. 研究目的与意义

基于普适性的国家标准分析不同松针针叶中聚戊烯醇的HPLC测定

聚戊烯醇（Polyprenols）类化合物是由一系列异戊烯基单元聚合和终端异戊烯醇组合而成的亲脂弱极性化合物，属于萜醇类化合物。聚戊烯醇及其酯类化合物是原核细胞和真核细胞天然膜的重要组成成分之一，参与糖蛋白的生物合成，维持植物正常生理代谢，是植物化学分类学重要的标志性化合物。可治疗再生障碍性贫血、糖尿病、高尿酸、高血脂和肝功能疾病、抗肿瘤、抗病毒，而且对人体安全无毒，无三致作用。

2. 国内外研究现状分析

国内研究概况;以中国林业科学研究所王成章教授带头主要从事银杏叶聚戊烯醇的提取、纯化、生物活性及化学合成。1994年，王成章等以马尾松、黑松、湿地松、雪松、园柏 5 种针叶为原料，通过索氏粗提、柱色谱纯化得聚戊烯乙酸酯，经1H-NMR、13C-NMR 波谱鉴定其所含的聚戊烯醇结构与银杏叶一致，均为桦木型聚戊烯醇，且其异戊烯基结构单元数在 13-22 之间，与哺乳动物的多萜醇结构一致。但是，对于松针中聚戊烯醇的提取纯化、生物活性、制剂开发、药效药理及临床应用等研究基本上还处于空白。 马尾松针叶在体内和体外都具有抗氧化活性，聚戊烯醇可在体内转化为多萜醇和多萜酰基磷酸酯，它们是糖蛋白生物合成的载体，但是对于聚戊烯醇抗氧化能力的研究还不够。多萜醇具有促进有机体造血功能，治疗再生障碍性贫血、肝脏疾病、糖尿病等有显著作用，桦木聚戊烯醇可以化学合成和自身细胞代谢成多萜醇。植物聚戊烯醇药理作用可以提高免疫功能、抗病毒，对Ec荷瘤小鼠具有明显的辅助化疗和减毒增效作用，抗老年痴呆病等神经系统的退行性疾病。针叶聚戊烯醇中、高剂量组可以明显降低肝损伤大鼠血清透明质酸、IV型胶原和丙二醛水平以及脾淋巴细胞增殖能力，显著升高血清超氧化物歧化酶水平，有效改善肝功能指标和肝组织形态，针叶聚戊烯醇对大鼠慢性免疫性肝损伤导致的肝纤维化有明显治疗作用，有望作为抗肝纤维化的新药进一步研发。现代医学研究表明，松针具有抗衰老、抗氧化、抗疲劳、祛风活血、明目安神、解毒、镇痛、抗炎、降血脂、降胆固醇、治疗神经衰弱等功效，被称为药物中的上药（既能维护生命，又有助于长寿）。目前国内企业主要生产松针维生素粉、松针叶绿素-胡萝卜素软膏、粉状松针膏饲料添加剂、松针叶绿素铜钠、松针香料、松针精油等。此外，还有部分生产松针水溶性物质、松针饮料、松针酒、松针茶的厂家。

国外对聚戊烯醇的研究已有50多年的历史，拉脱维亚、俄罗斯等国家主要从事针叶聚戊烯醇的提取，食品、化妆品和药品的应用，而且开发的药品已进 入Ⅱ期临床阶段。俄罗斯开发了针叶聚戊烯醇喷雾剂，预防和治疗流感。澳大利亚 Solagran 公司通过研究针叶聚戊烯醇对于早期和中期老年痴呆和其它脑疾病的影响发现，针叶聚戊烯醇能提高认知能力、改善脑症状，对于脑疾病有一定的疗效。日本 Curaray 公司开发了聚戊烯醇乳剂及胶囊，主要用于抗癌。拉脱维亚长期致力于针叶聚戊烯醇开发，现已建立了日产1Kg 的生产装置，除用于肝炎、乳腺癌及由免疫功能低下引起的多发性硬化症，同时被批准为保健品和化妆品添加剂。俄罗斯和拉脱维亚医科院利用针叶聚戊烯醇开发的Ropren制剂，用于免疫功能、护肝、多发性硬化症、抗肝炎病毒和艾滋病毒以及辅助化疗白血病等方面，药效明显。俄罗斯利用针叶聚戊烯醇开发成喷雾剂，可预防和治疗流感。植物聚戊烯醇与动物脏器中所含多萜醇结构相似，在体内中能够代谢为多萜醇，具有生理和药效作用，在保健食品和新药的开发方面具有巨大潜力。因此，迸一步提高植物聚戊烯醇的提取率，针对植物聚戊烯醇不同的药理活性，有望开发出更多的新产品。

3. 研究的基本内容与计划

1.研究内容

1.1不同品种聚戊烯醇的提取

以不同产地的松树针叶中的聚戊烯醇为研究对象，经石油醚热回流提取、皂化、石油醚萃取、硅胶柱层析、乙酸乙酯-石油醚溶剂系统梯度洗脱，再用0.45 μm滤膜过滤后得澄清液。

4. 研究创新点

松针中含有蛋白质、粗脂肪、萜类、黄酮、多元酚类、纤维素、叶绿素、维生素、氨基酸、微量元素等多种营养成分。目前聚戊烯醇制剂的药物开发已成为国际上的研究热点，有很好的应用前景。由于动物体内多萜醇含量极低，且分离纯化成本昂贵，因此限制了多萜醇的开发及应用，聚戊烯醇的化学结构与多萜醇(dolicho1)结构相似，多萜醇具有促进有机体造血功能，治疗再生障碍性贫血、肝脏疾病、糖尿病等有显著作用，桦木聚戊烯醇可以化学合成和自身细胞代谢成多萜醇。聚戊烯醇和多萜醇是生物体中对生物合成具有重要作用的类脂化合物。目前，我国对松针活性物质的开发还处于初步研究阶段，松针叶化学成分复杂，叶子中主要含有挥发油、黄酮类、脂类、苯丙素类、脂肪酸等活性成分，同时含有氨基酸、微量矿元素、维生素、叶绿素、不饱和脂肪酸、酶等活性物质。脂类成分聚戊烯醇普遍存在于松针叶中，且为其主要活性成分之一。聚戊烯醇是由不同数目的异戊烯基单元按一定顺序排列而成的类脂化合物。松针叶聚戊烯醇无毒、无突变、无致癌、无致畸作用，在防治老年痴呆、保护肝损伤、抗氧化、治疗硬化症等方面具有较好的活性。此研究是基于具有普适性的国家标准的验证性研究，同时，目前国内还未发现松针叶聚戊烯醇类制剂开发应用于临床，基于药理活性进行制剂研究具有重要意义和应用价值。