海绵固定化蔗糖异构酶产生菌Escherichia coli(pET22b-palⅠ)的研究开题报告

1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述1.细胞的固定化技术多数文献对固定化细胞的定义为：被限制自由移动的细胞，即细胞受到物理、化学等因素约束或限制在一定的空间界限内，但细胞仍保留催化活性并具有能被反复或连续使用的活力；也有文献将其定义为：把菌体细胞中特定的酶不经分离提纯，直接用适当的方法将菌体加以固定化来催化各种生化反应[1-3]。

1.1细胞的固定化的特点不管是哪种定义，固定化细胞都有一下特点：细菌生长停滞时间短、细胞浓度大、反应快，有较高的生产能力；细胞被固定化后，不会产生流失现象，可多次重复使用；对污染的抵抗力强，且分离纯化过程中菌体细胞易分离；可连续使用，避免反馈一直和产物消耗，蒸馏或提取前不用分去细胞，保持酶的原始状态，从而加强了稳定性。

固定化细胞也有其自身的缺点，如：必须保持菌体的完整，防止菌体的自溶，否则影响产物的纯度；必须抑制细胞内蛋白酶对所需酶的分解；胞内多酶存在，会形成副产物；载体、细胞膜或细胞壁会造成底物渗透与扩散的障碍[4-7]。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

1.研究目的本研究利用壳聚糖-明胶海绵固定蔗糖异构酶产生菌，提高细胞的操作稳定性和利用率，实现异麦芽酮糖的连续高效生产，为规模化生产异麦芽酮糖提供技术支持。

2.研究内容1、本研究通过向壳聚糖-明胶混合液中加入交联剂后，进行冷冻诱导相分离，然后经冷冻干燥制成多孔性、亲水性、机械强度良好的海绵状载体，并将制备好的壳聚糖-明胶海绵用蒸馏水洗至中性，再冻干。

2、本研究将冻干的海绵粉粹并溶解于磷酸缓冲溶液，加入escherichia coli bl21(pet-22b-palⅠ)和少量交联剂，进行预冻后冻干，即通过包埋法固定化细胞。