羰基还原酶的大肠杆菌工程菌的构建开题报告

 2021-08-14 06:08

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

毕业设计(论文)开题报告学生姓名: 邓叔明 学 号:3801110218所在学院:食品与轻工学院 专业:食品科学与工程 设计(论文)题目:羰基还原酶的大肠杆菌工程菌的构建指导教师:江凌 副教授2015 年1月 23 日毕 业 设 计(论 文)开 题 报 告文 献 综 述1羰基还原酶  羰基还原酶,是一种具有高度的化学 、区域和立体选择性的生物催化剂,常用于生物转化合成具有光学活性的不同种类的手性化合物[1-2]。

手性醇是一种重要的手性模块化合物,如光学纯苯基乙二醇是液晶材料中不可缺少的手性添加剂,也是制备具有光学活性的医药 、农药和功能材料的重要中间体[3-4]。

尽管研究者也试图通过构建基因工程菌来增加目标蛋白的表达量以促进转化反应,但是效果不显著 。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

1)利用PCR技术扩增羰基还原酶基因,选择载体和抗性基因,构建重组质粒;2)重组质粒导入大肠杆菌细胞内,并进行克隆筛选3)SDS-PAGE电泳检测羰基还原酶的表达;4)羰基还原酶酶活的测定与优化,通过对酶作用的不同pH,不同温度,不同诱导时间以及不同诱导剂的浓度进行考察,得到酶表达的最佳条件。

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