核酸适配体生物传感技术分析牛奶中黄曲霉毒素M1开题报告

 2021-10-17 06:10

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

文献综述1.1 引言随着我国居民的生活水平的提高和饮食结构的变化,乳及乳制品成为了我国居民的重要营养来源和日常消费的食品。

然而,随之而来的安全问题愈发引起人们的重视,其中霉菌毒素污染问题右为突出,霉菌毒素是一种存在饲料和原料中的抗营养因子,是毒素很强的霉菌次生代谢产物。

牧草等农产品在收割、运输与贮存过程中极易发霉,易被黄曲霉毒素侵染。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

2.1 研究内容2.1.1 核酸适配体序列的选取与合成2.1.2 氧化石墨烯的合成2.1.3 核酸适配体传感器条件优化实验(如go浓度)核酸适配体传感器的荧光实验 评价核酸适配体传感器对afm1的特异性识别能力的实验2.2 研究手段2.2.1 实验方法1. 项目研究路线根据核酸适配体传感器的原理:含荧光素的适配体可用荧光分光光度计测出其荧光强度,当溶液中没有afm1存在时,适配体会附着在go表面使荧光猝灭,从而检测不到荧光强度;而当溶液中存在afm1时,适配体会与afm1特异性结合,就不会再附着在go表面,便可用光度计检测出其荧光强度(如下图所示)。

因此,我们先用带荧光素的适配体与合成好的氧化石墨烯(go)进行混合得到适配体-go体系,将该体系与含有不同浓度的afm1标准溶液充分混合后,用荧光分光光度计测出并绘制出afm1浓度-荧光强度标准曲线;然后将该体系与制备好的样品溶液混合,进行荧光检测,根据测得的荧光强度,在标准曲线上便可找出相对应的afm1浓度,再结合稀释倍数等就可以计算出实际样品中afm1的浓度。

2. 优化实验步骤为获得适配体传感器对afm1的最佳识别能力,在含有afm1标准浓度的磷酸盐缓冲溶液中,进行go浓度优化实验、go猝灭时间确定实验,观察其荧光响应情况。

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