1. 研究目的与意义
1)内容:菊茎叶清肝明目功效研究离不开合适的证候动物模型,本项目采用足底注射lps法建立兔急性虹膜睫状体炎肝火上炎证候模型[1],该模型为湘雅医院国家中医药管理局肝脏象重点研究室的黎杏群教授研究团队建立,其相关研究成果荣获国家科技进步三等奖,具有一定的代表性。
分别给予菊茎叶水提物jst和醇提物jct,观察模型动物的病理改善情况。
进一步采用pcr及western-blot观察兔子体内与炎症相关蛋白的上调或下调,尤其关注erk1/2、src、p65、p38、stat3、jnk、iκbα、cox-2、inos、hmgb-1、myd88等相关基因和蛋白,探讨菊茎叶抗炎的生物学机制,为菊茎叶资源的综合利用提供科学依据。
2. 文献综述
菊花抗炎作用及抗炎机制的研究进展(南京中医药大学 季璇 041214216)[摘要]菊花为菊科植物菊的干燥头状花序。
为一种常用中药,具有疏散风热、平抑肝阳、清肝明目,清热解毒的功效,现代药理研究表明菊花具有抗炎、抑菌抗病毒、抗癌等作用,故临床多用于治疗风热感冒、目赤肿痛、头痛眩晕、疮痈肿毒等。
我国药用菊花资源丰富,品种具有多样性,在全国各产区都形成了不同种质的道地药材。
3. 设计方案和技术路线
研究方案1、菊茎叶分别用95%乙醇、超纯水加热回流提取,得到菊茎叶的醇提物及水提物。
2、应用lps足掌注射法建立兔子肝火上炎的模型,提取血液、房水、组织等样品。
3、统计分析提取样品的血管张力、炎症介质、眼相关指标及其上下游的基因、蛋白表达量。
4. 工作计划
2022年01月- 02月:查阅及整理菊茎叶抗炎的相关文献资料;2022年02月- 03月:分别提取兔子的相关肝、肾组织的蛋白并变性以及提取出rna并逆转录成cdna放置于-20℃冰箱保存。
2022年03月- 04月:应用pcr和western-blot测量上、下游的基因和目标蛋白表达量。
2022年04月- 05月:处理数据及撰写论文。
5. 难点与创新点
建立兔肝火上炎动物模型,采用传统非药用部位菊茎叶对其进行干预,运用PCR、western blot等分子生物学方法进行机制研究,阐明菊茎叶平肝明目的生物学机制。
