蚂蟥冬眠过程中糖、脂肪、蛋白质关键酶基因表达的研究开题报告

1. 研究目的与意义

1.本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等（列出主要参考文献）

水蛭是一味传统药材，始载于《是神农本草经》，2015年药典记载水蛭为蚂蟥（whitmaniapigra whitman）、水蛭(hirudonipponica whitman ) 和柳叶蚂蟥(whitmaniaacranulata whitman)的干燥全体。具有破血、逐瘀、通经之效^[1]。目前，随着药理研究和动物实验的深入发现，水蛭在治疗多种因瘀血所致的疾病中疗效确切，适应症包括心脑血管疾病、肾脏疾病、血液病变、男科妇科疑难症、外伤疼痛及呼吸、神经系统和肿瘤^[2]，临床应用前景十分广阔。本课题的研究对象为南京农业大学中药材科学研究所提供的蚂蟥（whitmaniapigra whitman）。

2. 研究内容和预期目标

研究目标：

本研究拟采用实时荧光定量pcr技术定量分析蚂蟥冬眠过程中肌肉和消化道组织中物质能量代谢关键酶相关基因表达，从分子生物学水平研究冬眠对蚂蟥能量代谢和药材水蛭品质变化的影响及相关性分析，丰富蚂蟥的基础研究，也为蚂蟥的越冬养殖提供一定的理论依据。

研究内容：

3. 研究的方法与步骤

4.研究方法及实验方案

1、蚂蟥冬眠设计

试验用蚂蟥统一暂养于透明玻璃缸中7 d，期间以天然饵料螺蛳常规饲喂。试验前停食2 d，随机选取10 g左右体格健壮的蚂蟥，置于480 ml注水2/3体积的广口玻璃瓶中，每瓶3条蚂蟥为一组，共设置30组。初始温度为25℃，以1℃/ d的速率降温至4℃，稳定。试验期间不投喂食物，虹吸法每天换1/2 体积4℃预冷且曝气的自来水。

4. 参考文献

特色或创新之处：

本次实验首次研究冬眠过程中蚂蟥三大物质代谢（糖、脂肪、蛋白质）关键酶的基因表达，探究蚂蟥三大物质代谢分子机制，分析蚂蟥冬眠期间三大物质代谢之间的联系，进一步了解蚂蟥冬眠期间的机能调控，分析冬眠时期蚂蟥的物质能量代谢变化，以期对蚂蟥的越冬养殖提供依据。

5. 计划与进度安排

研究计划及预期进展：

（1）2022年5月-2022年6月：

课题前期准备，熟悉所涉及的实验方法，查阅相关文献，准备开题。