不同温度对蚂蟥幼苗生长和免疫影响的初步研究开题报告

1. 研究目的与意义

本课题的研究对象为水蛭的其中一种宽体金线蛭（whitmania pigra whitman），俗称蚂蟥，最早收载于《神农本草经》，属于环节动物门黄蛭科动物[1]，其干燥全体为中药材水蛭，具有破血通经，逐瘀消癥的功效，用于治疗症瘕、痞块、血瘀闭经、跌打损伤[3],近年新发现水蛭制剂在防治心脑血管疾病和抗癌方面具有特效。

它在历史上以自然捕捞为主，因近年农药、化肥等滥用，及工农业三废对环境的污染，野生自然资源锐减，随着水蛭药用价值的深度开发，其市场需求潜力巨大。

近年来随着对水蛭药理等方面的研究进展，以药材水蛭为原料的药品及保健品日渐增多，但由于市场对水蛭药材的巨大需求以及环境污染的日益加重，导致其野生资源却日益枯竭，甚至到了濒临灭绝的地步[2]。

2. 研究内容和预期目标

研究的目标本实验通过不同温度下蚂蟥的饲养，探究高温和低温对蚂蟥死亡率、发病率、特定生长率的影响，及在高温和低温情况下免疫状况的变化和机理。

研究的内容本课题设计23℃、28℃、33℃三个饲养温度，测定不同温度下蚂蟥的生长率、存活率、特定生长率，并利用rna提取、反转录、荧光pcr反应等方法，研究不同温度对蚂蟥生长和免疫的影响，以期为蚂蟥养殖提供参考和依据。

拟解决的关键问题温度对蚂蟥生长和免疫的影响及其最适温度的探究

3. 研究的方法与步骤

研究方法用不同的温度处理幼龄蚂蟥，计算死亡率和特定生长率。

处理后的蚂蟥用荧光定量pcr技术检测生长、免疫基因和与温度有关基因的表达量。

技术路线实验方案1.蚂蟥处理取蚂蟥幼苗分别在23、28、32的温度下进行养殖试验。

4. 参考文献

近几年来，随着水蛭药用作用的深度开发，水蛭的市场需求和发展前景越来越大，对于水蛭的研究也越来越多，本实验通过荧光pcr技术检测蚂蟥的生长、免疫基因，进而了解温度对蚂蟥的影响状况，测量结果精确，反映直观。

温度是影响蚂蟥生长的一个重要因素，温度对动物生长的影响也是目前学多科研人员研究动物生存环境的重点。

本实验研究不同温度对幼龄蚂蟥生长及免疫的影响，探究温度对蚂蟥生长、免疫功能的影响状况及其机理，目前尚没有这方面的研究。

5. 计划与进度安排

研究计划2022.05-06 查阅相关文献，整理文献综述，制定实验方案2022.05-07 蚂蟥繁殖，幼苗的生长2022.07-08 不同的温度处理蚂蟥幼苗2022.10 学习并熟练操作提取RNA技术、反转录技术及荧光定量PCR技术2022.03 测定相关生长及免疫基因2022.04 整理所得结果，完成毕业论文预期进展目前，蚂蟥的饲养和特定生长率及死亡率的测定已完成和正在学习提取RNA技术、反转录技术及荧光定量PCR技术，预计在今年3月份内能将生长、免疫基因和温度有关基因在不同温度处理后的表达量做出来，完成实验；4月份整理所得，完成毕业论文。