1. 研究目的与意义
选题的意义:蚂蟥(whitmania pigra whitman)又称宽体金线蛭,隶属于环节动物门蛭纲,是2015版《中国药典》收录的药材水蛭基原动物之一。
水蛭作为中药始载于《神农本草经》,为传统活血化瘀药,具有破血消癥、逐瘀通经的功效。
随着国内外医学研究以及对水蛭利用价值的深入探究,全世界以水蛭为主要原料的药品和保健品日益增多。
2. 研究内容和预期目标
研究的目标:以低温处理进入冬眠的蚂蟥作为实验材料,分别测定蚂蟥体重、蛋白质含量、脂肪含量等生理指标,以及蚂蟥体内抗凝血酶含量变化情况。
以期望发现冬眠过程中蚂蟥的体成分变化和能量收支变化情况。
研究内容:1.测定冬眠对蚂蟥生长性能的影响;2.测定蚂蟥冬眠过程体成分的变化;3.测定冬眠对蚂蟥药材品质的影响。
3. 研究的方法与步骤
研究方法:1、测定蚂蟥水分(低温常压烘干法)2、测定水蛭灰分3、酸不溶灰分的测定4、测定蚂蟥蛋白质含量(凯氏定氮法)5、抗凝血酶含量测定6、测定蚂蟥脂肪含量7、测定蚂蟥总糖含量技术路线:实验方案1、测定蚂蟥水分(低温常压烘干法)取三只生长情况较均匀的蚂蟥称重,记录质量m1,将蚂蟥放入沸水(100℃)20min烫死,放入55℃烘箱中烘24小时烘干至衡重,称重记录质量m2,蚂蟥折干率= m2/m1100%。
2、测定水蛭灰分① 准备坩埚:根据样品数目准备相应个数坩埚,将坩埚清洗干净,并且用铅笔在坩埚底部标记好编号,同时用记号笔在坩埚盖子上标记相应编号,将坩锅和坩锅盖对应好称重,记录坩锅质量m1;② 样品预处理:取适量已经烘干至衡重的水蛭粉末放入坩埚中,称重记录质量m2;③ 碳化处理:在放入马弗炉前要先进行碳化处理,防止在灼烧时因温度过高,样品中水分急剧蒸发使样品飞扬,不经碳化而直接灰化,碳粒容易被包住,灰化不完全。
碳化在电炉上进行,将坩锅置于电炉,半盖坩锅盖小心加热使样品在通气情况下逐渐碳化,直到无黑烟产生;④ 灰化处理:碳化后,把坩埚慢慢移入马弗炉内,将马弗炉逐渐升温至550℃,并且550℃保持4h将样品完全灰化,将马弗炉关闭冷却,等炉内温度降至200℃后再小心取出坩埚,盖上盖子,及时移入干燥器内,待坩埚及样品降至室温再进行称重,记录质量m3;⑤ 计算灰分:灰分=(m3- m1)/(m2- m1)100%3、酸不溶灰分的测定向总灰分实验中加入10ml浓度为0.1mol/l的盐酸,盖上盖子80℃水浴加热10min,用热水冲洗坩埚及盖子,用无灰滤纸/定量滤纸过滤滤液及剩余灰分,用水多次洗涤坩埚、滤纸及残渣,将残渣连同滤纸移回原坩埚中,在电炉上灼烧至灰分完全消失,冷却,称重直至衡重,记录质量m4;酸不溶性灰分=(m4- m1)/(m2- m1)100%。
4. 参考文献
特色创新之处:本实验通过测定冬眠过程中蚂蟥生长性能指标、体成分指标以及药材品质指标,探究了蚂蟥冬眠过程中物质代谢变化及能量利用策略,加深了对蚂蟥冬眠生态学意义的理解。
5. 计划与进度安排
研究计划及预期进展 2022年5月2022年6月 查阅文献,准备资料,提出实验的具体方案 2022年7月2022年9月 进行预实验,优化实验方案为后来的工作打下基础。
进行实验,开始逐步进行各阶段各指标的测定,得到数据 2022年9月2022年10月进行试验,测定最后一个阶段的指标测定,收集数据 2022年11月2022年12月 分析数据。
2022年12月2022年1月 对不足实验进行改进,不恰当实验进行补足 2022年3月2022年4月 整理数据,完成论文,准备答辩
