甜叶菊莱鲍迪苷A生物合成途径解析开题报告

1. 研究目的与意义

1.课题意义甜菊糖苷是一种天然低热量的高倍甜味剂，从原产南美巴拉圭东北部的菊科小灌木甜叶菊 ( stevia rebaudiana bertoni) 的叶子中提取而得，甜菊糖在国际上被誉为 世界第三蔗糖[1]，是一种极好的天然甜味剂。

到目前为止，已从甜叶菊中分离得到 8 种糖苷[2]，莱鲍迪苷 a ( 简称 ra 苷) 与其它糖苷相比，其甜度高，约为蔗糖的300~400 倍[3]，而热量只有蔗糖的1/300。

且其结构明确，功能性、安全性更方便证明，它的纯化处理去除了带余味的其他糖苷的影响，因此作为天然植物提取物替代蔗糖的甜味剂更易被和西方国家所接受。

2. 研究内容和预期目标

1.研究目标目前ra生物合成途径研究成果的前提都是以st苷作为反应底物通过甜叶菊糖基转移酶ugt76g1的特异性催化生成ra苷。

但莱鲍迪苷b（rebaudioside, rb）和莱鲍迪苷c( rebaudioside, rc)与ra生物合成途径的关系仍不清楚，由此提出检测rb和rc是否能作为合成ra的反应底物。

又因为ra合成是糖苷化反应，因此提出检测供体是来源于adpg、udpg还是gdpg。

3. 研究的方法与步骤

1.研究方法实验前先使用文献研究法和比较研究法，通过知网、万方数据等平台对所需要研究的莱鲍迪苷a、糖基转移酶、糖基供体等对象进行实验研究进展的调查，已达到对实验对象有系统的了解，并对搜集到的资料进行分析、综合、比较、归纳，整理出前人实验涉及到的实验方法、具体操作步骤以及这些实验的共同性与不同性，提出自己的实验研究方法与实验方案。

实验过程中主要通过控制变量法和定量分析法来判断出莱鲍迪苷b和莱鲍迪苷c能否作为底物去合成莱鲍迪苷a以及确定该过程糖基供体的来源。

2.技术路线和实验方案 2.1甜叶菊总糖苷分离提取取甜叶菊干粉和0.1mol k-p溶液于冰上研磨，后加入超纯水匀浆，取12ml在离心机中以1000rpm、4℃离心十分钟。

4. 参考文献

通过探索莱鲍迪苷A的合成通路，确定莱鲍迪苷A合成过程的底物及其糖基供体，确定莱鲍迪苷A的生物合成途径的相关因素，提高甜叶菊中莱鲍迪苷A含量，为消费者提供替代蔗糖的天然优质甜味剂。

5. 计划与进度安排

1.2022年2月，搜集、整理莱鲍迪苷a的研究进展，确定实验方案。

2.2022年3月，进行实验，并不断总结反省实验不足之处，改善实验方案。

3.2022年4月，整理、分析实验数据，完成毕业设计初稿。