多年生黑麦草衰老相关ARR转录因子的克隆及表达分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

立项依据1.1 多年生黑麦草是重要的禾本科牧草，叶片衰老导致饲草产量和品质降低，抑制或延缓衰老是提高其饲草品质和产量的关键多年生黑麦草(lolium perenne l.)是一种重要的冷季型牧草，在全世界温带气候地带广泛种植。

但多年生黑麦草自身的叶片衰老速度较快，在理想生长条件下每个分蘖上也仅能保持3个完全展开的绿色功能叶片，限制其光合产物的积累。

此外，我国南方的夏季高温和季节性干旱等逆境条件导致多年生黑麦草叶片衰老加速，导致多年生黑麦草在缺乏管理的人工草地上退化严重（金学朋等, 2016）。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标（1）筛选在成熟叶和衰老叶中差异表达细胞分裂素信号通路arrs转录因子。

（2）克隆衰老相关arrs基因全长。

（3）明确衰老相关arrs基因在自然衰老和逆境诱导衰老过程中的表达模式。

3. 研究的方法与方案

2. 技术路线【分析多年生黑麦草成熟叶和衰老叶转录组数据】→【筛选出衰老相关细胞分裂素响应arr转录因子】→【衰老相关转录因子的基因生长克隆】→【自然衰老】---------]→【高温诱导衰老】----] →【干旱诱导衰老】----]→【盐胁迫诱导衰老】-] →【明确目标arrs在自然衰老和逆境诱导衰老条件下的表达模式】3.可行性分析 以下从工作基础、技术路线、实验条件三个方面进行可行性分析：（1）前期工作基础扎实：目前课题组已经测定了多年生黑麦草成熟叶和衰老叶的转录组，为本项目提供坚实的保障。

（2）技术路线合理：该项目的提出建立在指导教师在以往研究工作的经验基础之上，进一步开拓创新，且思路成熟，具备良好的技术储备。

（3）实验条件和科研团队：草业学院草坪草生理生化与分子生物学实验室包括生理室、分子室、组培室、人工气候室，仪器设备齐全，科研氛围优异。

4. 研究创新点

六、 特色或创新之处细胞分裂素是延缓叶片衰老的关键因子，但其调控机制尚未研究清楚。

本研究筛选多年生黑麦草衰老相关的细胞分裂素信号通路ARRs转录因子，克隆基因全长并明确其在自然衰老和逆境诱导衰老条件下的表达模式，为揭示细胞分裂素调控叶片衰老的分子机制奠定基础。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展（1）2017.8-2017.10查阅并参考相关文献，撰写文献综述，初拟实验方案。

（2）2017.11-2018.03多年生黑麦草衰老相关arr转录因子的筛选；基因全长克隆；逆境处理多年生黑麦草，衰老生理生化指标的测定及样品冻存。

（3）2018.3-2018.4多年生黑麦草冻存叶片的mrna提取及定量表达分析。