1. 研究目的与意义（文献综述）
蛋白质糖基化是自然条件下最重要的蛋白质翻译后的修饰过程，即在糖基转移酶作用下将糖转移至蛋白质,和蛋白质上的氨基酸残基形成糖苷键的过程。其中糖链在生物功能中起着重要的作用，如细胞粘附、信号转导和分子识别。糖基化蛋白糖链在蛋白质折叠、定位及蛋白间的相互作用中具有重要的意义[1-2]。而糖链有n-糖链和o-糖链两种，其中n-糖链的五糖核心有稳定的子结构，并且n-糖链组成的差异可以作为疾病预测和诊断的生物标志物，例如神经退行性疾病,代谢性疾病和肿瘤等[3]。因此，研究蛋白质的糖基化修饰及其在不同生理病理条件下的变化有重要意义。
目前，多种技术已经被应用于糖基化蛋白质中糖链的研究，例如色谱法、芯片法、核磁共振法、毛细管电泳法等，其中质谱技术已经成为糖链结构分析最有力的工具。因为色谱法、芯片法、毛细管电泳法主要用于分离，而核磁共振法需要样品量大，对于微量样品的检测无能为力，并且仪器昂贵，需要较强的专业技能来操作和解析图谱，而质谱技术是目前应用最广泛的糖结构分析的技术，主要有基质辅助激光解析电离(matrix-assistedlaserdesorption/ionization,maldi)和电喷雾电离(electrosprayionization,esi)这两类用于分析生物大分子的质谱系统称为生物质谱，因为maldi-ms和esi-ms在离子化时能量较低，可以使样品中各种分子更易产生完整的准分子离子，灵敏度更高，分子质量范围亦更宽，适合糖链样品量少或其衍生物样品的分析[4]。但esi-ms常与色谱联用，对样品要求较高；而maldi对样品要求相对较低，尤其是对na 、k 等盐离子容忍度高，因此较esi-ms相比无需复杂的样品前处理，所以本研究中采用maldi质谱。
2. 研究的基本内容与方案
（1）基本内容
将gt和gp试剂分别用于标准糖麦芽七糖的衍生化，用maidi质谱对衍生后的产物进行分析，找初最优的衍生化条件。
在最优的衍生条件下，对麦芽七糖进行肼衍生反应，寻找此反应的检出限。
3. 研究计划与安排
第1-3周：查阅相关文献资料，明确研究内容，了解研究所需试剂设备及实验进程。确定方案，完成开题报告。
第4-7周：针对不同的肼基标记物进行基于麦芽七糖的衍生反应，优化衍生条件。
第8-11周：针对最优肼基标记物进行基于n-糖链的衍生反应，maldi分析其衍生效率。
4. 参考文献（12篇以上）
[1]hannes,h.;patrick,n.;karsten,k.;chris,e.;ryan,b.;john,c.r.;bernhard,k.anal.chem.2012,84,37163724.
[2]chaofengwang,mingxiagao,zhihuang,xiangminzhang.c.wangetal./talanta117(2013)229–234.
[3]佟巍.基于化学衍生化的蛋白质n-糖链质谱鉴定新方法研究.军事医学科学院博士论文.
