1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
本课题意义：本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等（列出主要参考文献）nadph氧化酶（nadph oxidase)全称为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶，是一个异源多聚体蛋白。
植物中又被称作呼吸爆发氧化酶同系物(respiraty burst oxidasehomologue, rboh)[1]，是一类以胞质中的nadph为电子供体，将氧催化生成活性氧(reactive oxygenspecies, ros)的氧化酶。
rboh基因一般以基因家族形式存在，通过调节 ros的产生，在植物生长、逆境胁迫和细胞信号转导中起重要作用[2]。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：探究nadph氧化酶1基因的克隆方法及生物信息学。
内容：对nadph氧化酶1基因进行克隆，对克隆产物测序，利用生物信息学手段分析。
拟解决的关键问题：得到测序正确的克隆产物
3. 研究的方法与方案
研究方法：实验法，文献研究法，跨学科研究法，信息研究方法 技术路线：引物设计-提取番茄总rna-rtpcr-cdna文库-dna片段-构建克隆载体--产物测序-生物信息学分析实验方案：1、rboh1基因的提取（1）提取番茄rna、反转录cdna、并设计引物（2）pcr扩增预实验确定pcr扩增体系和条件：由引物的相关信息来推测其扩增时的退火温度，延伸时长等数据，因此需要多次梯度性的预实验来确定其最佳扩增条件。
（3）对pcr产物凝胶电泳检测步骤：制备琼脂凝胶、制备胶板、点样、电泳、凝胶成像观察（4）切胶回收在紫外灯下切下含有目的dna的琼脂糖凝胶、根据凝胶回收试剂盒具体步骤操作。
2、rboh1基因的克隆（1）双酶切：对目的基因、pet-28a( )进行双酶切获取带有活性端的基因片段。
4. 研究创新点
1、运用番茄基因组测序成果。
2、生物信息学分析。
5. 研究计划与进展
（1）2017.11~ 2017.12 以论文题目为核心，查文献找资料。
（2）2017.12 ~ 2018.2 根据查找的数据和相关资料，对实验出现的问题不断修正，探究pcr反应的最佳条件。
（3）2018.3 ~ 2018.4 克服实验中遇到的困难，完成产物测序、生物信息学分析；结合资料，撰写论文初稿。
