生物膜的提取及官能组分分析开题报告

 2022-01-23 20:36:16

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

一些生物通过污染水、大气、土壤等进而影响生物产量、直接或间接危害人体健康,这种污染被称为生物污染。

而微生物污染是生物污染中影响最广泛也最难以解决的一类。

许多漂浮在大气中的微生物造成的直接污染;水中微生物使水质更恶化,影响人体健康以及影响渔业;土壤中的微生物使人畜患病并降低农业生产;附着在食物上并进入人体使人类患病或者使食物腐败,生成毒素影响人体健康;医源性的微生物污染将导致菌体直接进入人体,是人体产生疾病并难以杀除菌体。

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2. 研究的基本内容和问题

本研究旨在能够通过正确的步骤提取出EPS并且在相关仪器和方法下测定总有机碳以及酸碱电位滴定和氧化还原电位滴定分析EPS,以确定官能基团。

待解决的问题是怎样提取EPS能使菌体内的物质和菌体尽量少的掺杂在EPS中,以便使之后的分析能够更加准确。

3. 研究的方法与方案

1、大肠杆菌、白腐真菌、酵母菌、枯草杆菌、天然淡水被膜上述菌体(除了淡水水膜外)分别培养,大肠杆菌和枯草杆菌用lb培养液(48小时),酵母菌和白腐真菌用专用培养基。

2、被摸提取直接离心法:a:培养好的细菌,3000g下初步离心6分钟,移除上清液;b:菌体加入超纯水至原体积,悬浮2-5分钟,再次离心,移除上清液;c:菌体加入超纯水至原体积,并悬浮菌体;d:悬浮的菌体移至超声清洗机,60w下超声7分钟;e:12000g、4℃下离心20分钟,上清液经0.45μm滤膜抽滤,以移除可能残存的菌体;f:3500da透析袋透析24小时,生物膜体积与透析的超纯水的体积为1:10.磁力搅拌器搅拌速度160转每分钟;g:收集透析袋内的溶液,为生物被膜悬浮液。

3、干重及分析干重:105摄氏度下,烘干后,自然冷却称恒重(三个平行);toc:总有机碳分析仪;电位滴定:两根电极,一根orp,一根ph电极;首先把ph溶液调整成酸性ph2.0,通过加naoh的方法(酸碱浓度相同),稳定后,记录点位及ph值,直至滴加到ph12.碘量法测定还原基团:提取的eps,通过高纯氮气连续除去氧气;通过电位计记录电位变化,逐渐加入碘量(0.01mm)水溶液。

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4. 研究创新点

本实验通过文献和实验来总结出更为适宜的提取方法并且不断地改进,以便能够精确的分析EPS中的主要成分、性质以及各种特性,使之后的学者能够得到有关EPS提取和分析的经验。

5. 研究计划与进展

2016.12.15至2017.01.15收集资料,查阅有关文献资料完成文献综述以及开题报告2016.12.20至2017.02.20在实验室学习相关仪器的使用,并进行原材料的提取和后续基团测定的实验2017.02.20至2017.03.15整理官能组分分析的结果并完整中期报告2017.03.15至2017.05.15根据处理的结果得出总结,并完成毕业论文2017.05.15至2017.05.20自审、互审,完善毕业论文,准备答辩

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