人血清中定量检测赫赛汀生物类似药ELISA方法的建立开题报告

1. 研究目的与意义

赫赛汀（trastuzumab，通用名：曲妥珠单抗）是一种重组dna衍生的人源化单克隆抗体，靶向作用于her2（人表皮生长因子受体-2）的细胞外部位，是癌症治疗领域第一个分子靶向性药物。

其于1998年9月首先被美国fda批准上市，至今已成为了治疗her2阳性乳腺癌的临床一线用药。

具统计，赫赛汀在2016年的全球销售额就超过了60亿美金。

2. 课题关键问题和重难点

关键问题：1、温育 不同的温育环境对检测结果有影响，操作中应严格按照说明书控制温育时间及温度，并注意封闭避免边缘效应。

2、洗板 用洗涤液洗板 3 次，洗涤液应严格按照操作说明进行稀释，洗板结束后将板拍干，应垂直扣在备好的干净的吸水纸或毛巾上，且注意每次更新干净的吸水纸或毛巾。

3、显色及结果判断 试剂显色时 a、b 液按顺序加入且间隔不超过10min，如先将两液混合再加样则需保证等体积混合。

3. 国内外研究现状（文献综述）

her-2位于染色体17q12-21.32上，属于egfr家族的成员，是一种原癌基因，在正常人体中几乎不表达，在肿瘤患者体内高表达[1]。

her-2的过度表达会促进dna的合成，促进肿瘤细胞的增殖，抑制肿瘤细胞凋亡，促进血管的生成，使肿瘤细胞的生长和侵袭加快。

有研究表明，在乳腺癌患者体内，her-2过度表达的患者，其10年生存率显著低于her-2阴性的患者，因此，her-2成为临床评价乳腺癌恶性程度、评估患者预后等指标之一，也是治疗的靶点。

4. 研究方案

利用双抗体夹心法对体内含抗体的人血清进行检测。

提前一天在板上包被上1～10μg／ml her 2。

次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。

5. 工作计划

18-19-1学期第19周：选定毕业设计课题，学习课题相关知识。

18-19-1学期第20周：进行企业岗位培训，通过考核获得实验资格，完善试验方法。

18-19-2 学期第1周：完成任务书的确认，准备和检查好实验所需要的仪器，样品，开始进行毕业设计，完成文献综述。