几种β-葡萄糖苷酶催化白藜芦醇苷制备白藜芦醇的性能比较开题报告

白藜芦醇化学名称为(E)-3，5，4-三羟基二苯乙烯。它是非黄酮类的多酚化合物，分子式为C₁₄H₁₂O₃，相对分子质量为228.25，为白色针状晶体，易溶于乙醚、氯仿、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸、乙酯等有机溶剂，在波长365nm的紫外光照射下能产生荧光，并能和三氯化铁-铁氰化钾起显色反应。在1939年的时候首次发现白藜芦醇，到了20世纪70年代首次在葡萄中发现这种物质，再后来人们在虎杖、花生、桑椹等植物中也发现这种成分。1992年在商业葡萄酒中首次发现白藜芦醇。国外研究表明，白藜芦醇是葡萄酒最重要的成分功效。

黄世友等学者^[5]从虎杖中提取白藜芦醇，根据化合物的性质以及伴存的杂质来选择提取方式，从而选择回流提取法，因为白藜芦醇苷相比于白藜芦醇难以被人体吸收，白藜芦醇在虎杖中占比0.3%，而白藜芦醇苷占比0.5%~1%。因此利用白藜芦醇苷β-D-葡萄糖苷酶来转化白藜芦醇苷，采用AB-8 大孔吸附树脂分离虎杖乙 醇提取物，分离白藜芦醇苷，再将两者混合，用酶转化得到白藜芦醇。

Shuang Jin.Meng Luo^[6]等发现黑曲霉广泛应用于不同天然产物的生物转化，提高生物转化速率，对不同共固定化菌株进行了优化，让黑曲霉与酵母共固定化培养，得到白藜芦醇产率最高(14.57 mg/g)，固定化AY处理虎杖根的最佳生物转化工艺为30℃、pH 6.5、2d、液固比12:1 (mL/g)。白藜芦醇的收率达到33.45 mg/g，是未经处理的3.04 mg/g的11倍。聚他汀的收率为0.41mg/g，下降了96.7%。

许南儿等人^[7]利用微生物产生的糖苷酶将虎杖中的虎杖苷转化为白藜芦醇，提高白藜芦醇的含量，首先对菌种富集与分离，于30 ℃ 的生化培养箱中培养48 h，挑取形态和颜色不同的霉菌菌落转接斜面培养基，置于30 ℃恒温培养48h，得孢子丰富的斜面菌株；挑取菌种斜面孢子，接入50mL产酶培养中，30℃、200r/min振荡发酵培养48小时，过滤，加入5g的虎杖粉，30℃、300r/min的水浴振荡转化反应24小时，用布氏漏斗抽滤，得到虎杖粉；取0.1g 虎杖粉样品，加入9 mL乙醇，37℃浸提12h，乙醇稀释2～3倍，0.22μm滤膜过滤后进行高效液相色谱分析，研究发现产酶培养基中蔗糖浓度过高或过低，均不利于黑曲霉XW-2产酶转化提高虎杖中白藜芦醇的含量，产酶培养基中蔗糖的最适浓度为40g/L。

董学伟等学者^[8]用酶转化法制备白藜芦醇，取经AB-8大孔树脂分离后的虎杖苷,配制成40g/L ,调整pH为5.0,加入适量酶, 60℃反应3h ,再除去酶。减压浓缩 ,低温干燥,得酶解产物。虎杖饮片1 kg粉碎后加6～8倍80%乙醇, 60℃提取3次, 2～3h合滤液减压浓缩, 除去乙醇后的提取物用水溶解成混悬液, pH5, 加入酶溶液 ,60℃反应3h ,再加入3倍95%乙醇终止反应并沉淀出酶。过滤,滤液减压浓缩干燥得虎杖酶解产物84.2g,HPLC检测虎杖酶解产物中白藜芦醇含量为 12.48%以虎杖饮片为基准 ,白藜芦醇提取得率为1.05%。

贾伟炜等^[9]采用植物精提复合酶辅助降解虎杖，通过酶解使植物细胞壁破壁，提高白藜芦醇溶出率，虎杖粉碎过筛，取5g,加入150ml锥形瓶中，加入110mLpH=6.5的水, 35℃下浸泡30min。加入0.5% 预先活化好的植物精提复合酶，45℃下浸提2.5h。过滤，滤渣再加入110mL提取液提取2.5h。过滤，合并2 次滤液，弃去滤渣。本研究发现:固液比1/22g/mL，酶用量0.50% ，提取温度45℃，提取液pH=6.5，提取时间5.0 h，提取2次。在此工艺条件下，虎杖中白藜芦醇提取率75.66%，纯度3.80%。