利用连续性内切纤维素酶从纤维素制备纤维寡糖的研究开题报告

1. 研究目的与意义

纤维寡糖(cello-oligosaccharide)又称纤维低聚糖，通常指由2-10个葡萄糖依靠β-1,4糖苷键相连而成的线性低聚糖，其化学结构如图所示。

纤维寡糖作为功能性寡糖家族中重要的一员可应用于食品、饲料添加剂和生物农药等领域，不仅能提高机体和植物免疫功能，还具有无毒、无污染、无残留、环境相容性好等优点，具有良好的经济效益和社会效益。

植物纤维素是自然界最丰富最廉价的可再生资源，是制备纤维寡糖理想的原料。

2. 国内外研究现状分析

纤维素的科研工作者开展了大量有关纤维素酶的研究，尽管对纤维素酶的水解机制有了一些认识，并提出了几种纤维素酶水解纤维素的假说，但是对于纤维素酶水解纤维素晶体机制还没有确切的了解。纤维素酶降解纤维素是酶的各组分之间协同作用的结果，并且有一个适当的活性比例，目前普遍接受的纤维素酶降解机制是协同作用模型，在协同降解过程中，首先由内切型纤维素酶在纤维素的内部起作用，在纤维素的无定形区进行随机切割，产生新的末端，然后再由外切型纤维素酶以纤维二糖或寡糖为单位，从末端进行水解, 最后由β-葡萄糖苷酶将纤维二糖或纤维寡糖水解为葡萄糖。顺序作用假说认为首先由内切酶随机作用于纤维素的葡萄糖苷键，打开缺口，然后由外切酶在新生链末端切下一个纤维二糖，再由β-葡萄糖苷酶将它水解成葡萄糖。

3. 研究的基本内容与计划

研究内容；（1）纤维素底物的制备方法和成分分析；

（2）来自的volvariella volvacea内切型纤维素酶eg(vv)的表达与纯化和催化性能的研究；

（3）利用内切型纤维素酶eg(vv)降解纤维素底物pasc和fp以制备纤维寡糖的酶解工艺，以及采用薄层层析法(tlc)等方法检测纤维寡糖种类和含量。

4. 研究创新点

来自Volvariella volvacea的外切型纤维素酶EG(Vv)降解纤维素制备纤维寡糖