突触后致密蛋白95与神经元型一氧化氮合酶蛋白相互作用抑制剂筛选模型的建立开题报告

1. 研究目的与意义

神经病理性疼痛在临床上是一种常见的慢性疼痛疾病，是一种由躯体感觉神经系统的损伤或疾病而直接造成的疼痛，已有药物治疗效果欠佳且副作用明显，常给患者带来巨大痛苦。

现有研究表明NMDAR/PSD95/nNOS信号通路在神经病理性疼痛过程中发挥重要作用。已有的药物多直接作用于NMDAR或nNOS，但这会影响其正常的生理功能，带来明显的副作用。如果能够找到一种直接阻断NMDAR和PSD95结合或者阻断PSD95和nNOS相结合的方法，将会在不影响NMDAR和nNOS正常生理功能的情况下，找到一条阻断NMDAR/PSD95/nNOS信号通路的道路。

2. 国内外研究现状分析

神经病理性疼痛是一种常见的慢性疼痛疾病，发病机制复杂且临床治疗效果欠佳。

最近研究表明， n-甲基-d-天冬氨 酸 受 体/突 触 后 致 密 蛋 白 95/神 经 元 型 一 氧 化 氮 合 酶 （nmdar/psd-95/nnos）复 合 物 在 神 经病理性疼痛中发挥重要作用。

目 前 ，不 同 类 型 的 新 的 镇 痛 药 正 在 开 发 之 中 ，以 psd95 为 靶 点 ， 设 法 抑 制 nmdar 与 psd -95 或 者 nnos 与 psd-95 的相互作用来治疗疼痛无疑成为研究的热点。

3. 研究的基本内容与计划

研究内容：

1、 查阅文献，研究psd95和nnos蛋白蛋白相互作用的机理，并设计psd95和nnos蛋白相互作用的蛋白片段。

2、表达重组蛋白并检测分析。

4. 研究创新点

HTRF技术结合了荧光共振能量转移（FRET，Fluorescence Resonance Energy Transfer） 和时间分辨荧光（TRF''Time Resolved Fluorescence)）两种技术。

该技术是利用了具有穴状结构的Eu元素的螯和标记物和XL665作为一个供体（Donor），是基于Eu穴状化合物的供体与受体（第二荧光标记物）之间的荧光共振能量转移（FRET）。