酪氨酸解氨酶在大肠杆菌中可溶性表达方法及其部分特性研究开题报告

1. 研究目的与意义

1) 了解酚酪氨酸解氨酶的研究现状，

2) 了解酪氨酸解氨酶的来源、外源表达方式、酶学特性、结构特征和作用机制等

3) 了解对香豆酸的生物生产途径

2. 国内外研究现状分析

2001年比利时根特大学蛋白生物化学与蛋白质工程系发现细菌酪氨酸氨裂解酶是光活性黄色蛋白的生物合成酶的表征。

2006年明尼苏达大学生物化学，分子生物学和生物物理学系发现酪氨酸氨裂解酶中的底物选择性开关是芳香族氨基酸裂解酶家族的成员。

2007年科学家trotman r , camp c , ben- b assat a 等人用的藻酸钙珠固定含有酪氨酸氨裂解酶的细胞来生产对羟基肉桂酸。

3. 研究的基本内容与计划

（1）参考文献及genbank中比对寻找高活性的酪氨酸解氨酶相关基因序列，优化其密码子偏爱性，人工合成基因，构建大肠杆菌表达载体；

（2）构建含分子伴侣pkje8、pgro7、pkje7、ptf2、ptf16等的表达载体共转化大肠杆菌，实现在大肠杆菌的活性表达；

（3）比较不同类型的分子伴侣对酪氨酸解氨酶可溶性表达的促进作用，

4. 研究创新点

构建含分子伴侣pKJE8、pGro7、pKJE7、pTf2、pTf16等的表达载体共转化大肠杆菌，增加酪氨酸解氨酶的可溶性