1. 研究目的与意义
本课题以桑黄为研究对象,利用菌株筛选技术,液体培养技术、HPLC、比色法等手段,对这种桑黄液体发酵生产的技术参数(培养基、pH值、培养温度、接种量、通气量、种龄等)等因子进行研究与优化,对产物的有效成分(多糖、黄酮、三萜类化合物等)进行分析、提取及测定技术研究,对桑黄液体发酵生产菌丝体、多糖、三萜类物质进行条件优化,以获得最高产量。确立桑黄液体发酵培养技术的最佳生产工艺及制定产品质量标准,为此桑黄商业化生产提供技术资料。
2. 国内外研究现状分析
桑黄在我国传统中药中用于治疗痢疾、盗汗、血崩、血淋、脐腹涩痛、脱肛泻血、带下、闭经,在日本作为利尿剂使用。目前主要应用于肝炎及癌症的治疗,因其治疗效果显著,风靡于日本及韩国,畅销不衰,并已经开始人工栽培并批量生产,美国和西欧对桑黄也略有研究。国内对桑黄研究较多集中于深层发酵条件优化、多糖分子结构、抗癌免疫学机理等。
自1948年美国humfeld h等成功地对蘑菇进行深层发酵和1958年szuees j等以发酵罐对羊肚菌的深层培养以来,液体深层发酵技术在食用菌制种、综合利用等方面的应用日趋广泛。我国已经进行深层发酵并工业化生产应用的食药用菌有冬虫夏草、云芝、竹荪等。但桑黄菌液体深层培养正处于研究起步阶段,桑黄菌菌丝生长最适培养基质和培养条件尚未研究清楚,单位体积培养基质收获的菌丝量非常少。因此,开展液体培养条件下对桑黄的营养需求特性和液体培养工艺条件进行全面深入系统的研究,以便为其发酵提供科学依据。
真菌多糖是非细胞毒物质,作为药物的最大优点是安全、无毒副作用,是一类理想的非特异性免疫增强剂。其抗肿瘤作用的显著特点不是直接作用于癌细胞,而是通过参与机体免疫反应,调节机体的免疫力而使肿瘤受到抑制,起到免疫疗法的作用 。鉴于真菌多糖显著的抗癌活性及其独特的免疫增强作用,上世纪90年代在南京举行的国际食用菌研讨会上,桑黄菌已被列为当前国内外最为热门的抗癌防癌食药用菌研究之一。但至今在国内市场上尚未见到桑黄菌多糖产品。因此,抓住机遇,加快桑黄菌发酵多糖的开发,具有重大的社会效益和经济效益。
3. 研究的基本内容与计划
研究内容:
1、以菌丝体得率及有效成分为指标,研究适宜的复合碳源、复合氮源、无机盐和维生素等,及其培养基组分的组成和多因素影响;
2、探索培养时间、通气状况、搅拌速度、温度、接种量和初始ph值等对桑黄发酵培养的影响。
4. 研究创新点
液体发酵技术具有周期短、发酵条件易控制等优点,可获得纯菌丝体、多糖等不同种类的产物。液体发酵技术不仅为桑黄的培养提供技术支持,而且为桑黄的开发利用提供优势。
