Dictyoglomus thermophilum木糖苷酶基因的克隆表达及酶学性质测定开题报告

1. 研究目的与意义

了解木糖苷酶的研究现状和木糖苷酶的应用领域。

主要根据木糖苷酶的来源、表达方式、酶学特性及作用机制等方面的研究状况展开论述。

了解嗜热微生物来源的木糖苷酶的克隆表达的方式方法和重组蛋白亲和纯化的方法及木糖苷酶的酶学性质研究。

2. 国内外研究现状分析

β-木糖苷酶在内的木聚糖酶系已在多个领域具有广泛应用。

在国际能源工业中，工农业废弃物中的木聚糖可被木聚糖酶系转化为木糖，而木糖又可被细菌及真菌转化成酒精等有价值的燃料；在国际造纸工业的纸浆漂白中，β-木糖苷酶与木聚糖酶协同作用可以有效提高漂白性能；在国际医药行业中，木聚糖酶系水解特定底物可产生在医药行业具有重要应用价值的中间转化产物。

鉴于木聚糖酶系具有如此广泛而重要的用途，人们对其中的木聚糖酶进行了系统的研究，但β-木糖苷酶却未得到足够重视。

3. 研究的基本内容与计划

研究内容：

(1) 参考文献并及genbank比对嗜热菌dictyglomus thermophilum rt46b.1的木糖苷酶基因序列，进行克隆表达；

(2) 构建含有木糖苷酶基因及pet20b表达载体转化大肠杆菌，实现大肠杆菌的活性表达。

4. 研究创新点

本课题拟通过对木糖苷酶的来源、表达方式、酶学特性及作用机制等方面展开研究，了解嗜热微生物来源的木糖苷酶的克隆表达的方式方法和重组蛋白亲和纯化的方法及木糖苷酶的酶学性质研究。

进一步优化β-木糖苷酶在木聚糖降解为低聚木糖的过程中作用的发挥以及在生物漂白预处理方面明显提高漂白度的作用，更加有利于环境保护。