1. 研究目的与意义
磷是植物生长所必需的大量元素之一，在植物生长代谢过程中必不可少。
植物需要的磷主要从土壤中获得。
土壤中的磷包括无机磷和有机磷两大部分，有机磷在土壤磷库中所占比例一般为全磷的25%-70%，对土壤肥力和植物营养有着重要的影响。
2. 国内外研究现状分析
植酸酶的研究已有90多年的历史，而从90年代开始的植酸酶基因工程方面的研究，越来越受到人们的广泛关注。
迄今为止，共有来自细菌、真菌和植物体十余个植酸酶编码基因得到了分离克隆，分别来自霉菌、细菌和酵母等，这些分离到的植酸酶编码基因几乎都申请了专利。
其中，首先分离到的植酸酶基因是aspergillus ficuum nrrl3135的phya基因，该基因全长1506bp，基因编码467个氨基酸，n端的19个氨基酸为信号肽。
3. 研究的基本内容与计划
1.荧光假单胞菌JZ-DZ1植酸酶基因表达载体的构建（2015.01-2015.02）1.1 植酸酶基因表达引物设计1.2 植酸酶基因表达部分PCR扩增1.3 pET-28a( )菌株活化，质粒提取1.4 分别对植酸酶基因PCR产物及pET-28a( )质粒双酶切，并将酶切回收的片段相连接，得到重组质粒1.5 重组质粒的鉴定2.荧光假单胞菌JZ-DZ1植酸酶基因的诱导表达（2015.03-2015.04）2.1 重组质粒转化表达感受态2.2 重组质粒在大肠杆菌中诱导表达2.3 表达产物收集3.表达产物的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）检测及酶活性测定（2015.04-2015.05）
4. 研究创新点
本研究的基础已经完成荧光假单胞菌jz-dz1β-螺旋植酸酶基因的全长扩增。
β-螺旋植酸酶多属于中性植酸酶，之前已研究的肠杆菌科细菌的植酸酶基因大都是属于组氨酸酸性磷酸酶家族的酸性植酸酶基因，而对它们中性植酸酶基因的研究较少。
因此，本研究拟通过将大肠杆菌（escherichia coli）作为原核表达宿主来表达荧光假单胞菌的β-螺旋植酸酶基因，为进一步了解该基因的功能以及研究植酸酶的酶学性质奠定基础。
