松材线虫主要精子蛋白RNA干扰及功能研究开题报告

 2021-08-09 00:15:33

1. 研究目的与意义

松材线虫病是一种由松材线虫引起的导致松树枯萎的毁灭性虫害,而主要精子蛋白在松材线虫精子中占有很大比例,对松材线虫精子的移动起到主要作用,RNA干扰是利用小片段的RNA对目标基因进行特异性的结合从而达到基因沉默的作用。由于松材线虫致病机理尚不清晰,本研究将从松材线虫的繁殖入手,以松材线虫近缘种拟松材线虫为参比对象,在克隆松材线虫主要精子蛋白全长cDNA 的基础上,系统分析该基因在基因组中的结构特征、RNA干扰后的表达水平变化和表型变化,借助生物信息学和生物学表型分析等方法,评价该基因的RNA干扰在松材线虫防治中的应用潜能,为揭示松材线虫的繁殖、种群扩张和防治奠定重要基础。

2. 国内外研究现状分析

1松材线虫病原研究

关于松材线虫病病原研究主要有2种观点:(1)松材线虫是引起松树萎蔫的病原(2)松材线虫病是由松材线虫和细菌共同引起。但是,松材线虫携带细菌致病假说对许多现象无法作出合理解释,如无法对松材线虫的致病性分化,特别是同一地区的松材线虫的致病性分化做出合理的解释。尽管学术界对松材线虫的病原物还存有一定的争议,但植物病理学界一直认为松材线虫是引起松树萎蔫的主导因素。因此,从松材线虫本身出发,来探讨该病的致病机制依然是各国线虫学家研究的主要方向。

2松材线虫病的致病机理研究

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3. 研究的基本内容与计划

2012.3-2013.4

1.利用生物信息学软件,进行基因结构特征及其对应蛋白序列特征进行分析。

2.采用 pcr 方法获取主要精子蛋白(msp)在基因组中的结构特征生物信息学分析及利用试剂盒(megascript rnai kit)合成 dsrna。

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4. 研究创新点

关于松材线虫致病机理研究尚不清晰,本研究从松材线虫的繁殖力入手,着重探讨松材线虫繁殖的分子基础,特别是阐明主要精子蛋白在松材线虫精子的形成与运输过程中的作用,尝试从新的视角即生物学性状繁殖力来探讨松材线虫的防治。通过分子生物学热点RNAi技术,充分利用其具有特异性、高效性、传染性等相关特点,来抑制主要精子蛋白的表达,为探索松材线虫病新的防止途径奠定重要基础。

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