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1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1.课题的研究意义和应用前景
我国是水果生产大国，果树种植面积和水果产量均居世界首位。近年来，随着人们物质生活的日益改善及健康保健意识的不断提升，水果的消费总量在逐年增加，但与此同时，消费者对水果的品质特征的要求也日趋多元化。显然，品质上佳的水果深受消费者们的爱戴，也能大大增加果农的经济收入。成熟即为果实品质达到最佳食用状态，涵盖了果实中糖、酸、香气等风味物质的积累与代谢。可见，成熟是各类果实品质性状研究的基础，成熟性状解析是优异新品种选育的铺垫和前提。
梨是我国第三大水果，栽培面积和产量均居世界第一。据联合国粮农组织（fao）最近的统计数据，2012年全世界梨树栽培总面积162.30万hm2，总产量2358.08万t，其中，我国梨树栽培面积已达到113.67万hm2，产量达到1626.60万t，分别占世界面积和产量的70％和68%以上，在世界梨产业中占有十分重要的地位。为此，本项目选用多个不同成熟时间的梨品种作为研究对象，开展果实成熟分子调控机制的研究，明确梨果实成熟的响应和调控基因，为梨新品种的选育提供分子基础，这无疑有利于我国果树产业的可持续健康发展，符合我国农业发展的重大战略需求。
2. 研究的基本内容和问题
1.研究目标
（1）揭示外源aba和乙烯对‘翠冠’梨果实外观和内在品质发育的影响；
（2）建立乙烯利和1-mcp处理‘翠冠’梨果实的基因表达谱数据库；
3. 研究的方法与方案
1. 实验方案
实验一：外源ABA处理对‘翠冠’梨果实发育的影响
①配制5个梯度浓度的ABA溶液（0.1、1、10、100和1000 mg/mL），从‘翠冠’梨花后30天开始，每隔15天分别单独处理30个梨果实，直至采收前。
②观察处理果实成熟时间的变化，并采收成熟果，测量色差、单果重、纵横径、硬度、可溶性固形物和总酸等生理指标。
实验二：外源乙烯利和1-MCP处理对‘翠冠’梨果实发育的影响
① 根据课题组前期研究结果，分别配制300 μL/L乙烯利和1.0μL/L1-MCP溶液，在果实采收前40和50天分别独立处理30个梨果实；
② 观察处理果实成熟时间的变化，并采收成熟果，测量色差、单果重、纵横径、硬度、可溶性固形物和总酸等生理指标。
③ 取乙烯利处理成熟果实及其对照，无处理成熟果实及其同时期1-MCP处理果
实，提取总RNA后，进行转录组测试，构建基因表达谱数据库。
实验三：梨果实中乙烯合成和信号传导途径各关键基因的鉴定
① 分析转录组数据，分离出与果实成熟正相关的乙烯合成和信号传导路径各关键基因；
② qRT-PCR验证分离基因在取样果实中的表达谱；
③ qRT-PCR检测分离基因在其它未成熟和成熟梨果实中表达水平的差异，从而明确乙烯合成和信号传导途径各关键基因。
2. 可行性分析
（1）项目申请人所在的南京农业大学梨工程技术研究中心拥有江浦、白马和湖熟3个基地，保存有梨资源1000余份，为本项目的顺利开展提供充足的材料保障。
（2）项目申请人所在的南京农业大学梨工程技术研究中心仪器设施条件齐备，各种生理指标测定和分子生物学技术平台良好。
（3）本项目指导老师长期从事果树果实发育生物学的研究，在J Exp Bot、Tree GenetGenomes、Sci Hortic等期刊发表SCI论文10余篇,具备扎实的理论和技术指导能力。
3. 技术路线
4. 研究创新点
（1）首次探讨ABA对梨果实发育生理机制的研究；
（2）首次鉴定翠冠梨果实成熟乙烯调控路径的各关键基因。
5. 研究计划与进展
研究计划：
2018.3 制定试验计划和实施方案；
2018.4 配制aba、乙烯利和1-mcp溶液；
