文献综述
1 非酒精性脂肪肝
非酒精性脂肪性肝病，是一种无过量饮酒史，由各种原因引起的肝细胞内脂肪堆积，以肝细胞脂肪变性和脂质蓄积为主要特征的临床病理综合征。其病理变化随病程的进展而表现有单纯性脂肪肝、高脂血症、高血压，并被认为是代谢综合征在肝脏的一种病理表现[1]。由于生活质量的提高和社会压力的增大，非酒精性脂肪性肝病越来越普遍，许多研究认为，非酒精性脂肪肝进一步发展可演变为脂肪性肝炎、肝硬化，甚至有转化为肝癌的潜在可能性，对人类健康带来严重的威胁[2]。高脂血症是形成非酒精性脂肪肝的基础，而肝脏的脂肪病变进一步影响脂质代谢，从而加重高脂血症形成恶性循环，高脂血症性脂肪肝发病机制至今尚未完全明确，目前也缺乏理想的治疗药物。目前，探讨非酒精性脂肪肝的发病机制以及针对性治疗已成为临床热点话题。为了研究非酒精性脂肪肝发病机制及药物治疗效果，国内外较多的研究报道了非酒精性脂肪肝动物模型，动物模型的建立主要有先天性、转基因动物、化学物质诱导、病毒诱导以及高脂饲料诱导这 5种实验性动物模型，其中利用高脂饲料诱导的脂肪肝动物模型，其病理特点与人类相似，病变有一定的发展过程，成功率高、死亡率低，方法简单易行，容易重复[3]。目前，基本采用大鼠、小鼠、兔等动物来建立动物模型，大鼠和小鼠模型虽然容易建立，但不易长时间用药观察；兔模型抵抗力差，在建模过程中容易继发感染而死亡[4]。并且近几年研究建立的动物模型所采用的高脂饲料的配比、建模时长、给药时间和方式均不一致，这样在研究方面就有不同的参考价值。因此，建立与人类非酒精性脂肪肝发病相近的动物模型，探其发病机制，寻找有效的治疗药逐渐引起重视。
2 RIP1激酶的作用机理
细胞凋亡是指为维持机体内环境稳定，由基因所控制的细胞自主有序的死亡，是细胞的一种基本生物学现象，在维持细胞内环境的稳态、在生物体的进化、内环境的稳定以及系统发育中起着重要的作用[5]。凋亡是半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（cysteinyl aspartate specific protease, caspase）依赖性的，而程序性坏死是caspase非依赖性的[6]。研究发现，受体相互作用蛋白1（receptor-interacting protein 1）是具有特异丝氨酸/苏氨酸激酶活性的蛋白，属于受体相互作用蛋白家族（RIPS）RIP蛋白家族是一类重要的调节细胞死亡或存活的信号分子[7]。目前，RIP家族由7个成员组成，即RIP1~RIP7。RIP家族与肿瘤、自身免疫性疾病、退行性疾病等多种疾病的发生有着密切的关系，在调控细胞死亡、免疫应答和炎症反应中发挥不同的作用，是一个在细胞内保有多重角色的重要传感器，近年来受到很大的关注成为研究的热点[8]。其C端含死亡结构域（death domain，DD）通过自身相互结合或与其它含死亡结构域的分子（如 TRADD、Fas、TNFRI）结合，参与肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor、TNF）、FasL刺激后的信号转导，介导 NF-kappa;B活化，并诱导细胞凋亡，其功能受泛素化、锌指蛋白及热休克蛋白等的调节[9] RIP1首先被发现现在TNFalpha;或TLR3/TLR4-TRIF介导的NF-kappa;B信号通路活化过程中发挥作用。在TNFalpha;激活的信号通路中，泛素化的RIP1作为支架蛋白招募并结合下游信号分子从而介导NF-kappa;B的活化，驱动相关促炎因子和炎症介质的基因转录和表达[10]。研究表明，RIP1 激酶的活化与缺血性损伤、炎症性疾病、神经退行性疾病密切相关[11]。以 RIP1 为靶点，设计 RIP1 激酶抑制剂用于治疗自身免疫性脑脊髓炎等神经退行性疾病[12]。除了介导NF-kappa;B活化外TLR3/TLR4-TRIF-RIP1通路还可以活化干扰素调节因子转录因子（IRFs）从而诱导I型干扰素的表达[13]。但是，当RIP1的泛素化被抑制或者被降解后，RIP1转而与caspase-8和FADD蛋白结合为死亡诱导复合物，介导细胞凋亡的发生；但当caspase-8被化学抑制剂抑制或者遗传性缺失时，RIP1则通过与RIP3之间的相互作用，促使细胞执行程序性坏死[14]。
除了调控NF-kappa;B活化和细胞死亡外，研究还发现RIP1还参与调控NLRR3炎症小体的活化，在病毒或者细菌感染以及内质网应激诱导的炎症小体活化和1L-1beta;释放中发挥了重要作用[15]。综上所述，RIP1蛋白作为细胞内重要的信号传感器，参与调控了多条信号通路和细胞效应，包括NF-kappa;B和IRF信号通路、细胞凋亡和程序性坏死以及炎症小体。RIP1 作为细胞存活或者死亡的关键调节蛋白，自从其被发现以来就备受关注。其不仅参与促细胞存活的信号传导，还参与多种途径的细胞程序性死亡信号传导，与多种疾病如癌症、神经退行性疾病、自身免疫性疾病密切相关。
本课题要研究或解决的问题：
研究RIP1激酶在非酒精性脂肪肝炎疾病发生发展中的作用，在整个过程中，RIP1激酶对脂肪肝的各个病理指数的影响，并探究其中的机理。
RIP1激酶属于受体相互作用蛋白家族，在调控细胞凋亡、坏死以及炎症反应过程中发挥了关键作用。我们前期研究还发现RIP1激酶活性在调控饱和脂肪酸棕榈酸诱导的炎症小体活化和细胞死亡过程中扮演重要角色，因此我们推测RIP1激酶参与调节非酒精性脂肪肝炎的发生和发展。本课题利用RIP1K45A/K45A激酶失活的转基因小鼠，通过给小鼠喂食蛋氨酸和胆碱不足（MCD）饮食构建非酒精性脂肪肝炎模型，通过检测小鼠肝损伤程度、免疫细胞浸润、炎症因子释放、炎症基因表达、血清中甘油三酯和胆固醇等病理变化和生化指标，从而确定RIP1激酶活性是否在NASH的发生过程中起调控作用。
