一、课题背景及意义
中药应用历史悠久，我国历代中医药学家对中药的疗效和安全性有着深刻的认识，《神农本草经》中提出“应奏效而止，取效为度”的用药原则，提示人们应该重视中药的毒性作用。中药的胃肠毒性反应较常见,发病率高,致死率低,多与中药所含的有毒物质或其代谢产物，以及方剂中某些药物配伍后产生相互作用, 通过直接或间接途径影响胃肠组织结构或生理功能。
青黛是一味具有良好药效作用的常用中药，有清热解毒、凉血止血、清肝定惊等功效，是我国中药宝库中的瑰宝，在世界范围被广泛使用。虽然在2015版药典中青黛不属于有毒中药品种，但近年临床报道青黛相关制剂长期口服给药后不良反应出现比例高达40%，其中胃肠和肝脏为主要不良反应器官，极大限制了其临床使用随着青黛在临床上的广泛应用。2004年至2012年6月,国家药品不良反应监测中心病例报告数据库中有关复方青黛丸(胶丸、胶囊、片)病例报告344例,不良反应/事件主要累及消化系统、皮肤及其附件、精神系统等,临床主要表现如腹泻、腹痛、肝炎、肝功能异常、头晕等；严重病例报告23例，临床主要表现为药物性肝损害和胃肠出血。课题组对2010年至2020年的中国期刊全文数据库和NCBI pubmed数据库进行青黛制剂不良反应文献统计，检索到文献42篇共计328例复方青黛制剂不良反应病例，对文献进行分析，主要有以下特点：
①青黛不良反应文献研究集中于临床病理报告（95%），因此亟待深入开展关于青黛不良反应机制的研究。
②青黛制剂临床不良反应既包括肝功能不全、腹泻、腹痛和头痛、轻微恶心等轻微不良反应，还包括肠套叠、肺动脉高压等严重不良反应，其中胃肠道反应占60%，肝损伤占25%。
③青黛制剂在临床上出现不良反应的时间50%发生在服药两个月以上，只有20%的患者不良反应发生时间在服药1个月以内。日本临床上以2-3g/day的剂量长期使用青黛治疗溃疡性结肠炎，所以肠套叠、肺动脉高压等严重不良反应出现的比例相对更高。
张莉等通过分析院内六例因服用含青黛成分导致便血病例，发现青黛引起的肠道黏膜损伤的病变范围较为广泛,常累及直肠,与一般的缺血性结肠炎不同,提示是由于多发的较小血管的病变引起广泛的结肠缺血。Kondo等分析了两例因口服青黛出现不良反应的病例，患者均有腹痛与血性腹泻，并表现出壁水肿与增厚。分析病患切除的标本后得知，从前青黛引发的结肠炎的内镜和病理学特征与慢性缺血性结肠炎相吻合，但该标本的病理学检查显示出，相较于缺血性改变更贴近于炎症的病理学特征。Makoto等进行随机双盲安慰剂对照实验评估了青黛对于溃疡性结肠炎患者的疗效及安全性，显示出显著的剂量依赖性临床反应，大约60%患者在8周内每天接受2g青黛可实现粘膜愈合，但仍有轻度肝功能不全，头痛和胃肠道症状，但这项研究由于患者出现肺动脉高压而停止研究，并得出需谨慎使用青黛的结论。
目前有关青黛的不良反应报道集中于临床病例统计，深入的作用机制研究尚属空白，更多的实验需要开展来研究其不良反应的机制。石娅萍等进行了青黛单次给药肠胃毒性研究，其中给予小鼠1g/kg青黛（临床剂量20倍）可促进小鼠的肠推进及排便功能。此外，在为期八周的青黛小鼠实验中，未出现明显肠道不良反应，分析原因为其在小鼠动物毒性模型上隐匿性较强，具有种属差异，这也是青黛不良反应研究基础薄弱的重要原因。Adachi等利用青黛治疗由恶唑酮OXA诱导的病鼠模型，改善了皮炎症状并减少了IL-4和嗜酸性粒细胞的募集，尽管肠道中诱导结肠炎的关键细胞因子IL-3减少，但OXA小鼠结肠炎明显加重。当肠道菌群枯竭后诱发结肠炎时，利用青黛治疗会改变肠道菌群，并且不会加剧结肠炎。朱璋佩等开展的青黛大鼠给药90天胃肠毒性研究中，给药组的主要毒性反应为体重增长缓慢，以及大便量增多，摄食量下降，停药后基本恢复正常，未发现有病理性损伤，有关其不良反应的具体机制仍缺乏具体研究。由于青黛的不良反应在小鼠动物毒性模型上隐匿性较强，具有种属差异，这是青黛不良反应研究基础薄弱的重要原因。选取理想的动物模型，重现青黛在临床上出现不良反应，是深入开展青黛不良反应作用机制研究的前提条件。由于缺乏青黛不良反应动物模型，导致其不良反应机制仍为空白。本课题前期研究发现，豚鼠可以做为青黛毒性研究的动物模型，其肠管较长约为体长的十倍，有利于后续研究。本课题的研究目的是建立豚鼠的靛玉红肠道不良反应模型，为后续的靛玉红毒性机制研究提供基础。
靛玉红(Indirubin)又称2-(2-氧代-1H-吲哚-3-亚基)-1H-吲哚-3-酮,分子量:262.2628，能够从具有青黛、大青叶、板蓝根中提取分离，主要用于治疗慢性粒细胞白血病,有少量报道初步认为本品对缩小伴有巨脾的骨髓纤维化患者脾脏亦可能有一定疗效。近年来研究表明，靛玉红通过抑制蛋白激酶来发挥抑瘤作用，包括CDKs、Src激酶等，主要有三种途径：
①靛玉红及其衍生物拮抗CDK激酶的ATP结合位点
