特利加压素的标记与条件优化研究
- 实验背景
肝肾综合征( Hepatorenal syndrome,HRS) 常出现于严重肝病患 者病程后期,主要表现为进行性少尿或无尿、血尿素氮及肌酐升高等,但肾脏病理检查无明显器质性病变,是一种进行性、功能性的肾功能不全，一般预后很差。尤其是I型HRS,大大缩短了患者的存活时间。
目前,肝移植和人工肝是 HRS 患者首选的治疗方案,但是治疗费用很高, 对患者家庭造成沉重的经济负担，同时由于肝源有限,管理过程复杂,很容易引起并发症等原因，在实际应用中的效果并不尽如人意。因此，找到可以逆转 HRS 的药物，为肝移植赢取时间,具有重要的临床意义。
特利加压素的化学名称为三甘氨酰赖氨酸加压素，是一种新型的人工合成的长效血管加压素制剂。它是一种前体药物，本身无活性，在体内经氨基肽酶作Chemicalbook用，脱去其N末端的3个甘氨酰残基后，缓慢“释放”出有活性的赖氨酸加压素，因此特利加压素相当于一个能以稳定速率释放出赖氨酸加压素的储藏库，其能改善肝肾功能，逆转HRS，延长HRS患者的生存时间，故延长肝移植的等待时间。同时，特利加压素是食管静脉曲张出血患者在紧急情况下的重要治疗药物，是唯一被证明延长食管静脉曲张出血患者生存时间的药物。此外特利加压素在治疗难治性休克、肝硬化腹水、手术中低血压及小儿心脏骤停有一定作用，具有良好的临床应用前景，但是，特利加压素的体内过程仍然是需要阐明的一个重点，同时利用放射性示踪技术对药物的体内过程进行追踪的技术也已成为近些年来的研究热点，这是因为相对于常规生物样本检测技术，放射性标记示踪技术优势明显，例如生物体对标记与非标记的药物分子不做区分，两者所表现的生物学特征是一致的，同时，放射性核素通过衰变释放可被检测的射线信 号进行物质定量和定位，可以避免生物基质的干扰。随着放射性标记技术的迅速发展，在药物发现和开发阶段中的应用也越来越广泛。
氯胺-T是一种氧化剂, 其水溶液可使阴离子碘氧化成碘分子, 这种活性碘分子可取代肽链上酪氨酸苯环上羟基位的一个或两个氢, 据此可以设计由放射性碘同位素所取代的氯胺-T分子，使之成为含有放射性的碘化酪氨酸多肽链，因而采用适当的碘同位素可以实现对目标分子特别是一些多肽类药物的标记，从而方便对其体内过程进行进一步研究，本研究利用氯胺-T法对多肽类药物特利加压素进行标记，采用Sephadex G100层析法对已标记的特利加压素进行分离，并利用gamma;放射性免疫检测仪检测放射强度，测定标记率，探讨最适合的标记方法以及提高标记率的优化方案。
- 实验目的及意义：
在这项研究中，我们利用碘的同位素125I对特利加压素的放射性标记条件进行了研究，分析了特利加压素标记率的影响因素，并对如何提高特利加压素的标记率进行了研究和探讨，通过胆管插管构建特利加压素在小鼠体内的分布模型，并利用gamma;放射性免疫检测仪检测放射强度
- 实验内容：
- 实验动物
动物：SPF级昆明小鼠（雌雄各半），体重20.0plusmn;2.0克
试剂：注射用特利加压素冻干粉、PBS、Na125I溶液，氯胺T溶液（或Iodogen溶液）
仪器设备：电磁搅拌器、层析柱、gamma;井型探头、纸层析设备、Sephadex G100葡聚糖凝胶、0.22mu;m滤膜
2、实验步骤：
