中国药科大学毕业设计开题报告
题目：ORF1微肽在体外的炎症调控作用
所在学院：生命科学与技术学院 专业名称：海洋药学
简介：ORF1是一个由29个氨基酸组成的内源性微肽，该微肽可能调控巨噬细胞的分化，进一步对炎症进行调控。巨噬细胞作为炎症阶段的主要吞噬细胞，它在病原微生物感染时可以极化为产生促炎因子的M1型，具有很强的杀死微生物特性；M1型巨噬细胞通过分泌促炎性因子与趋化因子，并专职呈递抗原，参与正向免疫应答。为了研究ORF1的炎症调控作用,首先通过免疫印迹法检测ORF1在巨噬细胞中的表达情况，以此判断ORF1是否可以调控炎症因子。其次，研究外源的ORF1微肽对巨噬细胞增殖及分化的影响：将不同浓度的ORF1与巨噬细胞共孵育，检测共孵育后的细胞活性以判定ORF1对巨噬细胞增殖活性的调控作用；在LPS诱导巨噬细胞分化的基础上添加外源的ORF1，通过检测炎症因子的表达情况判断分化程度，进而评判ORF1对巨噬细胞分化的影响。完成以上实验后，分析实验数据，即可得出ORF1对炎症的调控作用。
国内外研究情况：目前对炎症调控的研究主要集中在各种分子对巨噬细胞的影响方面，巨噬细胞作为一种重要的免疫细胞，在体内抗原呈递、引发体内的炎症反应、清除体内的废物等生理活动中具有重要作用。当前研究主要集中于分子对巨噬细胞的分化的影响，巨噬细胞分化为M1型时表面会分泌多种炎症分子，包括TNF-alpha;、IL-10beta;，IL-6等，这些分子可以作为判断巨噬细胞分化的依据。在判断某一分子是否具有炎症调控作用时也常以这些分子作为指标进行判断。
短开放阅读框（sORF）是具有潜在蛋白质编码能力，长度约为100个密码子的开放阅读框【5】，已在各种转录本中被揭示，包括长链非编码RNA (LncRNAs)、mRNA、环状RNA等【6】。sORF编码的微肽已被证明在基本的生物过程和维持细胞稳态中有重要的作用。这些微肽可以独立发挥作用，例如作为配体或信号分子，也可以通过参与和调节更大的调节蛋白来发挥其生物学功能。鉴于微肽的体积小，它可能特别适合微调复杂的生物系统【7】。微肽有的高度保守而另一些则具有物种特异性，这证明微肽同时发挥着基本功能和特异性功能。研究表明，微肽对于胚胎生成、肌生成、炎症、疾病和癌症具有不同的调节和监控作用。不过虽然ncRNA衍生的微肽的存在现在被普遍接受，但只有少数已被实验验证为具有生理功能的真正的蛋白质。因此，应进行系统、全基因组的功能筛查，以描述生物活性微肽的特征。【1】
研究意义：分析ORF1的体外炎症调控可以为由癌症等引起的炎症反应提供诊断依据，为癌症的早期发现与早期治疗提供思路。ORF1的体外炎症反应的实验对免疫学的发展具有重要的意义，对炎症发生时免疫系统的反应有更深的描述。对于巨噬细胞的分化与增殖研究具有重要的指导意义。对于类似ORF1的由ncRNA等序列编码的微肽在体内的作用以及其在免疫反应中的地位，可有ORF作为参考，进行实验的设计。
实验目的：研究ORF1微肽对炎症的调控作用
