虎杖愈伤组织培养体系的建立文献综述

 2022-12-06 17:05:26

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

课题背景:

植物是天然药物的主要来源之一。许多植物能产生各式各样次生代谢产物。包括酚类、黄酮类、生物碱、有机酸、糖苷、萜类和多炔类等[1]很多植物次生代谢产物具有特殊的生物活性,长期以来,被人类作为药物使用。我国对植物药的开发和利用也有着悠久的历史。据统计,我国现已查明的药用植物有 1 万 多种[2]。但是我国目前常见的 1000余种中草药中,70%以上源于野生采挖[3]。传统药用植物的生产能力与我们庞大的用药需求之间有着巨大的差距。而野生植物资源的过度采集也使得许多药材陷入了绝种的危险境地。虎杖就是陷入危机的药材的一种[4]。

而植物组织及细胞培养技术的发展为解决这一困境提供了一条可行的道路。20世纪60年代 , 法国的morel用茎尖培养的方法大量繁殖兰花获得成功,揭开了植物快速繁殖及无病毒种苗研究和应用的序幕 。目前,通过离体培养获得小植株并且具有快速繁殖潜力的植物已有100多科1000 种以上 , 有的已经发展成为工业化生产的商品[5]。

而这一技术在药用植物的培养上也焕发出巨大的活力。目前,我国已建立起红豆杉、紫草、银杏、藏红花等 200 余种中药的组织和细胞培养体系[6]。但是真正进入产业化的细胞系并不多。主要问题在于无法得到繁殖温定代谢产物产量产的细胞培养体系[7]。为了能够得到稳定高产的细胞体系科研工作者们在这方面开展大量的工作。以虎杖为例,许多科学工作者都针对虎杖愈伤组织的培养大规模条件以及主要药用成分白藜芦醇的代谢程度进行了大量的实验,取得了一定的成果,主要为虎杖愈伤组织培养以及悬浮细胞培养的各种理化数据[8-13]。但是这些成果依旧处于实验室阶段,未进入大规模生产,原因在于研究所得数据并不足以支持体系的建立。本科题意在结合之前的实验方法,通过试验不同的实验变量,通过外植体诱导出虎杖愈伤组织,考察理化因子对体系生长的影响,对建立虎杖愈伤组织培养体系提供数据上的补充和参考。

课题实验流程:

1,实验器具准备

镊子,手术刀,剪刀,铁盘(与纱布一起包装),无菌水(超纯水,每次实验10瓶左右),空瓶3-4个左右。所有器具均通过灭菌锅灭菌,镊子,手术刀,铁盘,枪头等需用报纸包裹。

2试剂和所用仪器

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