- 课题背景
缺血性脑血管病发病率和致残率高，严重影响中老年人的身体健康，寻找和开发治疗脑缺血损伤的药物非常重要。临床治疗缺血性脑病常用方法是尽快恢复大脑血液供应但在恢复过程中又会进一步加重对大脑的损害。大脑中动脉范围的脑缺血是临床最常见的脑缺血类型，脑缺血再灌注后常常引起一系列复杂的病理过程，包括缺血期的原发性损伤和再灌注的继发性损伤，脑组织缺血氧及再灌注后自由基损伤、细胞内钙离子超载、白细胞集聚、炎性细胞因子的损伤、兴奋性氨基酸的神经毒性作用、缺血区的代谢障碍以及水电解质紊乱、基因表达异常等因素。血脑屏障破坏进而发生的脑水肿是脑缺血再灌注损伤过程中的重要的病理环节之一，可加重神经元损伤，影响预后及功能恢复甚至危及患者的生命。研究某一药物对脑缺血再灌注后脑水肿的保护作用具有重要意义。
经多年中草药筛选发现，川芎嗪具有明显器官缺血再灌注损伤的保护作用，以其活性成分2,3,5,6-四甲基吡嗪和阿魏酸进行结构改造合成的新型化合物奥扎格雷钠，再进行结构改造化合物吡拉格雷钠，已有研究吡拉格雷钠能够明显改善大鼠大脑中动脉栓塞脑缺血再灌注模型的大鼠脑微循环血流量并对vWF、TM、EPCR均有抑制作用，对血管内皮细胞有明显的保护作用，进而对脑缺血再灌注损伤有保护作用。另有研究表明吡拉格雷钠与阿司匹林联用比单独用药具有更有效的抗血小板聚集作用，并对大鼠脑缺血再灌注损伤有更显著的保护作用。现针对吡拉格雷钠对脑缺血再灌注后48小时脑水肿的保护作进一步研究。
- 课题目的、设计方法及实验基本操作技术
1、目的：
观察吡拉格雷钠对大鼠脑缺血再灌注后48小时神经学评分、脑含水量、血脑屏障通透性的影响。对吡拉格雷钠用于治疗缺血性脑血管病的作用进行初步探讨。
2. 实验方法
2.1 动物分组及给药
健康成年雄性sprague--Dawley大鼠60只，体重200g-250g，将动物随机分为假手术组、脑缺血再灌注模型组（I/R）、奥扎格雷钠18mg/kg剂量组、吡拉给雷纳30、18、10.8mg/kg剂量组。脑缺血再灌注后立即尾静脉注射相应的药物，连续给药2天，给药剂量0.2ml/100g。假手术组和脑缺血再灌注模型组注射等容积的生理盐水。
2.2造模方法
将麻醉成功的大鼠仰卧位固定在手术台上。剪毛,常规消毒皮肤,颈部正中切口约2一3cm,逐层分离,暴露左侧颈总动脉,钝性分离左侧颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)、颈内动脉(ICA)及迷走神经,仔细分离尽量减少对迷走神经的刺激。在近颅底处分离颈内动脉颅外段唯一分支-翼愕动脉,并将其起始部结扎，游离颈外动脉主干一段,，在颈外动脉下垫双线分别两次结扎颈外动脉,两节点之间保留一定距离(约2mm),提起一端,将颈内、外动脉分叉处分离干净。用血管夹夹闭颈总动脉，颈内动脉,将右侧颈外动脉近心段剪开一小口,将所做成线栓子缓慢插入ECA及ICA入颅至大脑中动脉(MCA)开口处,鱼线插入深度平均为18.5士0.5mm，外留1cm长渔线,此时即在大脑中动脉起始端堵塞大脑中动脉,造成局灶性脑缺血，结扎渔线与血管。缺血后120min实施再灌注,再灌注时无需再次麻醉动物,将大鼠仰卧固定于手术台上，将置于皮下的渔线尾端轻轻拔出，扎死CCA前端，消毒并逐层缝合皮肤。
假手术组：除不插鱼线外，其余操作与手术组相同
