开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
- 拟研究问题
本课题拟探索黄芩苷对LPS诱导PC12损伤的保护作用,为进一步揭示黄芩苷抗凋亡,改善小鼠抑郁样行为的细胞分子机制提供基础。
二、研究手段
- PC12细胞培养,采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导PC12细胞建立体外细胞凋亡模型,再以黄芩苷干预凋亡细胞;
- 采用流式细胞术检测黄芩苷对PC12凋亡的抑制作用;
- 噻唑蓝( MTT) 比色法检测PC12细胞的存活率,从而测出黄芩苷合适的给药浓度;
- Western Blotting检测Rock2、NHE-1、calpain1、bcl-2、bax、caspase-3蛋白的活性并测试其表达;
- 采用Fenton 反应及Gress 显色原理测定活性氧(ROS)等指标;
本实验研究黄芩苷对LPS诱导PC12损伤的保护作用,采用脂多糖( lipopolysaccharide,LPS) 诱导PC12细胞建立体外细胞凋亡模型,以适当浓度黄芩苷干预其凋亡过程,研究黄芩苷对LPS诱导PC12损伤的保护作用。LPS作用于PC12细胞,参考MTT检测结果及ROS等指标判断细胞生长情况,以适量黄芩苷作用于细胞,采用流式细胞术检测黄芩苷的抑制凋亡效果,Western Blotting检测Rock2、NHE-1、calpain1、bcl-2、bax、caspase-3蛋白活性及表达。
三、文献综述
黄芩苷对LPS诱导PC12损伤的保护作用研究
14405911 赵婷
摘要:黄芩Scutellaria baicalensis Georgi属于唇形科黄芩属多年生草本植物,其以干燥根入药,味苦、性寒,有清热燥湿、泻火解毒、止血、消炎、抗氧化,保护细胞免受损伤[[1]]等功效。中药黄芩主要有效成分为黄酮类,其中黄芩苷( baicalin) 的含量最高,其具有促进神经分化,防止外伤性癫痫等神经保护作用。在慢性应激抑郁模型,黄芩苷有着显著的抗凋亡,改善小鼠抑郁样行为的作用。基于此,本课题拟研究黄芩苷对LPS诱导PC12损伤的保护作用,为进一步揭示黄芩苷抗凋亡、改善小鼠抑郁样行为的细胞分子机制提供基础。
关键词:黄芩苷;LPS(脂多糖);PC12(人鼠嗜铬细胞瘤细胞);细胞凋亡;
- 黄芩苷(baicalin)
黄芩为唇形科植物黄芩的根,味苦,性寒,具有清热燥湿、泻火解毒、止血安胎的功效。黄芩苷(baicalin,C21H18O11))是从中药黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的干燥根中提取的一种黄酮类单体物质,也是黄芩的主要有效成分,1923年Shibata首次提取成功,至今已有近90年历史,具有多种药理作用,如降压、镇静、保肝、利胆、抗菌、抗炎、抗变态反应、清除超氧阴离子、调节免疫功能的作用,临床上主要用于上呼吸道感染,肺炎等感染性疾病以及肝炎、风湿热等自身免疫性疾病治疗。
