【研究背景】
非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)是一种常见的慢性肝脏疾病，全球患病率约为25%[1]。NAFLD 包括了非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver, NAFL)和非酒精性脂肪肝炎(Nonalcoholic steatohepatitis, NASH)两个阶段，前者特征为肝脏单纯性脂肪变性或伴有轻微的小叶炎症，后者则在此基础上出现了广泛的肝脏炎症浸润和肝细胞损伤。其中，NASH被认为是NAFLD中的进行性亚型，约占25~30%[2]。NASH阶段的肝损伤进程如果未得到及时地遏制，则可能发展为更为严重的肝硬化，甚至肝细胞癌。目前，越来越多的证据表明NAFLD是一种多系统疾病，影响肝外组织器官及调控通路[3]，所以NAFLD病程中的并发症也逐渐受到人们的关注。
在大量对于NAFLD和NASH的流行病学调查研究中，发现NAFLD/NASH人群中有更高的神经功能损伤和精神行为改变的发生率，主要表现为多数NAFLD患者合并有焦虑或抑郁[4][5]。这些精神状况不仅影响患者的生活质量，也使得针对NAFLD的治疗效果变差[6]。另有一项荟萃分析指出肝病死亡率与心理压力具有相关性，且在NAFLD亚组中相关性强[7]，提示我们应该意识到精神因素在NAFLD/NASH病程进展和治疗中的重要性。此外，在NAFLD个体中肝药酶表达和活性改变，对精神药物的代谢和药效产生影响[8][9]。有的抗抑郁药还可能加重NAFLD患者肝脏损伤或产生其他不良反应[10][11]，但也有一些精神药物对肝脏病变有潜在的治疗作用[12]。所以我们需要阐明NAFLD并发焦虑、抑郁的关联机制，从而更好的认识疾病和选择合适的治疗药物。
构建一个符合焦虑/抑郁样精神行为的NAFLD动物模型，有助于揭示潜在的病理生理学基础和后续的药物筛选。高胆固醇饮食(High-cholesterol diet, HCD)是一种常用的诱导动物NAFLD的方法，已在多种动物上广泛运用[13][14][15]。且HCD已被证明可以引起动物的焦虑/抑郁样行为，可能与单胺系统异常[16]、免疫炎症[17][18]有关。此前的研究已经在啮齿类动物上构建了HCD诱导的NAFLD伴焦虑/抑郁样模型[18]，但造模时间长、花费大、样本量少的问题有待解决。
【研究目的及意义】
- 在斑马鱼幼鱼上构建稳定的NASH伴焦虑/抑郁样模型，为后续的机制研究和药物筛选提供一个低消耗、高通量工具。
- 探索挖掘NASH与焦虑、抑郁等精神改变发生之间可能的关联机制，为进一步的分子通路研究奠定基础。
【研究内容】
1.课题框架
本课题主要包括：动物模型构建、机制探索两部分内容。我们通过高胆固醇饮食诱导斑马鱼幼鱼NASH发生，并通过生化检测、脂质染色和组织病理学检查来确认幼鱼的NASH表型。同时，通过旷场试验、新罐试验、明暗偏好试验和十字迷宫试验等行为学方法，评价幼鱼造模后的精神变化情况。两者结合起来判断是否成功构建了具有NASH伴焦虑/抑郁样表型的实验动物。
