开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、课题背景
21 世纪以来，全球毒潮泛滥，毒品问题日趋严重。毒品来源多元化、毒品滥用多样化、制贩吸毒一体化的趋势更加明显，毒品问题已成为我国乃至全球性的社会顽疾。据《2016 中国禁毒报告》显示，截至 2016 年底，全国共有吸毒人员 250.5 万名，其中新发现吸毒人员 44.5 万名，且吸毒人员低龄化特征明显。
为应对如此严峻的禁毒形势，我国毒品案件侦查工作正由信息主导向情报主导转变。通过综合搜集、分析和使用各种情报信息，引导警务决策和资源分配，从而实现禁毒行动的主动预防和精确打击。在新的形势下，情报是毒品犯罪案件侦查的起点和灵魂。然而与此同时，涉毒人员的反侦查意识和能力在不断增强，涉毒活动日趋智能和隐蔽，传统的情报搜集方法如人力搜集、公开搜集等已经难以完全适应禁毒工作对于情报的需求。因此，随着科技的进步，越来越多的新的科学技术手段正逐渐被应用于禁毒工作中的情报收集。在应用传统理化技术的基础上，色谱、红外、质谱等高精度仪器分析技术也逐渐被应用于禁毒工作中，由此获得的情报为打击犯罪提供了强有力的证据。环境污水毒品检测技术所提供的情报信息是禁毒情报工作需求与科学技术手段发展相契合的典型例证。[1]
- 要解决的问题
污水中毒品的测定方法已经基本完善，对方法进行方法学验证
- 仪器与材料
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设备名称 |
规格、型号或厂家 |
药品与试剂
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6-MAM |
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苯丙胺 |
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可替宁 |
美国Cerilliant公司 |
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可卡因 |
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氯胺酮 |
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MDA |
|
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MDMA |
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甲基苯丙胺 |
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可待因 |
美国Cerilliant公司 |
|
MDMA |
|
|
MDA |
|
|
去甲氯胺酮 |
美国Cerilliant公司 |
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苯甲酰爱康宁 |
美国Cerilliant公司 |
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甲卡西酮 |
美国Cerilliant公司 |
|
吗啡 |
美国Cerilliant公司 |
|
6-MAM-D3 |
美国Cerilliant公司 |
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苯丙胺-D5 |
美国Cerilliant公司 |
|
甲基苯丙胺-D5 |
美国Cerilliant公司 |
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可替宁-D3 |
美国Cerilliant公司 |
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氯胺酮-D4 |
美国Cerilliant公司 |
|
去甲氯胺酮-D4 |
美国Cerilliant公司 |
|
MDMA-D5 |
美国Cerilliant公司 |
|
MDA-D5 |
美国Cerilliant公司 |
|
吗啡-D3 |
美国Cerilliant公司 |
|
可待因-D6 |
美国Cerilliant公司 |
|
可卡因-D3 |
美国Cerilliant公司 |
|
苯甲酰爱康宁-D3 |
美国Cerilliant公司 |
|
甲卡西酮-D3 |
美国Cerilliant公司 |
|
乙腈（色谱纯） |
TEDIA公司，美国 |
|
甲酸（分析纯） |
南京化学试剂股份有限公司 |
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甲醇（色谱纯） |
TEDIA公司，美国 |
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超纯水 |
南京妙之仪有限公司 |
|
氨水（分析纯） |
南京化学试剂股份有限公司 |
|
盐酸（分析纯） |
南京化学试剂股份有限公司 |
仪器
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1290 Infinity II UPLC |
Agilent公司 |
|
6470 Trip Quad LC-MS （CPUCDQE-EQP-LCMS-04） |
Agilent公司 |
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Supelco Visiprep 24TM DL固相萃取仪 |
Supelco公司 |
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百万分之一天平 |
Mettler Toledo公司 |
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LABCONCO真空离心浓缩仪 （CPUCDQE-EQP-CENCON-02） |
LABCONCO公司 |
|
Eppendorf涡旋仪（CPUCDQE-EQP-VORT-02） |
Eppendorf公司 |
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D34135R低温冷冻离心机 （CPUCDQE-EQP-FRECEN-02） |
BioTool公司 |
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VX2500涡旋仪 （CPUCDQE-EQP-VORT-01） |
VWR公司 |
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MCX固相萃取柱 |
Waters 公司 |
|
GE Whatman无粘合剂玻璃纤维滤纸GF/CTM |
GE公司 |
|
Waters Prime MCX |
Waters公司 |
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Agela SPE Coloumn 60 mL |
Agela公司 |
|
Agela 小柱连接配适器 |
Agela公司 |
三．色谱和质谱条件
3.1 色谱条件
色谱柱：Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 (50 mmtimes;2.1 mm, 1.8 mu;m)
流动相：A：0.1%甲酸水溶液
B：乙腈
表1. UPLC梯度洗脱条件
|
时间（min） |
流速（mL/min） |
A（%） |
B（%） |
|
0.0 |
0.3 |
95 |
5 |
|
6 |
0.3 |
75 |
25 |
|
6.2 |
0.3 |
0 |
100 |
|
8 |
0.3 |
0 |
100 |
|
8.1 |
0.3 |
95 |
5 |
|
11 |
0.3 |
95 |
5 |
柱 温：40 °C
进样室温度：4 °C
进样量：5 mu;L
3.2 质谱条件
离子源为电喷雾离子源(ESI 源)，检测方式为ESI ，毛细管电压为3.5 kv，离子源温度为300 °C，脱溶剂气温度为250 °C，脱溶剂气流速为11 L/min，锥孔反吹气流速为5 L/min，脱溶剂气体为N2，碰撞气体为N2，扫描方式为MRM，根据质谱扫描结果确定各待测物的MRM监测通道，具体见表2。
表2. 各待测物的MRM监测通道
|
Compound |
MRM m/z |
Collision (kV) |
Dwell |
|
6-MAM |
328.1→165.0 328.1→211.1 |
50 29 |
7.5 |
|
Amphetamine |
136.1→91.1 136.1→119.1 |
20 5 |
7.5 |
|
Cotinine |
177.2→98.1 177.2→80.1 |
21 29 |
7.5 |
|
Cocaine |
304.1→182.1 304.2→82.1 |
22 33 |
7.5 |
|
BZE |
290.1→168.1 290.1→105 |
21 33 |
7.5 |
|
Ketamine |
238.0→125.0 238.1→207.1 |
30 12 |
7.5 |
|
MDA |
180.0→163.0 180.1→105.1 |
10 25 |
7.5 |
|
MDMA |
194.1→163.0 194.1→105.1 |
9 25 |
7.5 |
|
Methamphetamine |
150.0→91.1 150.1→119.1 |
20 9 |
7.5 |
|
Methcathinone |
164.1→131.1 164.1→146.1 |
20 13 |
7.5 |
|
Morphine |
286.1→201.0 286.1→165 |
35 50 |
7.5 |
|
Norketamine |
224.1→125.0 224.1→207.0 |
29 9 |
7.5 |
|
Codeine |
300.1→165. 300.1→199.0 |
60 40 |
7.5 |
|
6-MAM-D3 |
331.2→165.0 331.2→211.1 |
29 45 |
7.5 |
|
Amphetamine-D5 |
141.1→93.1 141.1→124.1 |
17 7 |
7.5 |
|
Cotinine-D3 |
180.2→101.1 180.2→80.1 |
25 29 |
7.5 |
|
Cocaine-D3 |
307.2→185.1 307.2→85.1 |
21 33 |
7.5 |
|
BZE-D3 |
293.1→171.1 293.1→105 |
21 33 |
7.5 |
|
Ketamine-D4 |
242.1→129.0 242.1→211.0 |
33 16 |
7.5 |
|
MDA-D5 |
185.1→168.1 185.1→110.1 |
9 25 |
7.5 |
|
MDMA-D5 |
199.1→165.1 199.1→107.1 |
13 29 |
7.5 |
|
Methamphetamine-D5 |
155.1→91.1 155.1→121.1 |
21 9 |
7.5 |
|
Methcathinone-D3 |
167.1→134.1 167.1→149.1 |
25 13 |
7.5 |
|
Morphine-D3 |
289.1→201.2 289.1→165 |
35 50 |
7.5 |
|
Norketamine-D4 |
228.1→129.0 228.1→211.1 |
29 9 |
7.5 |
|
Codeine-D6 |
306.2→165.1 306.2→202.1 |
45 30 |
7.5 |
五．溶液的配置和样品预处理
5.1 对照品溶液的制备
取6-MAM，苯丙胺，甲基苯丙胺，吗啡，MDMA，MDA，甲卡西酮，氯胺酮，可卡因标准品约2 mg，精密称定，置于10 mL量瓶中，其中，6-MAM，吗啡，可卡因和甲卡西酮用乙腈溶解并稀释至刻度，其余待测物用甲醇溶解并稀释至刻度，配制成含各待测物约200mu;g/mL 的一级储备液。取苯甲酰爱康宁，去甲氯胺酮，可待因，可替宁，可替宁-D3的1 mg/mL标准品溶液1 mL于10 mL容量瓶中，甲醇稀释至刻度，配制成含各待测物100mu;g/mL的一级储备液；取苯丙胺-D5，甲基苯丙胺-D5，MDA-D5，MDMA-D5，苯甲酰爱康宁-D3，吗啡-D3，氯胺酮-D4，去甲氯胺酮-D4，可待因-D6的100mu;g/mL标准品溶液1 mL于10 mL容量瓶中，甲醇稀释至刻度，配制成含各待测物10mu;g/mL的一级储备液；取甲卡西酮-D3，6-MAM-D3，可卡因-D3的100mu;g/mL标准品溶液1 mL于10 mL容量瓶中，乙腈稀释至刻度，配制成含各待测物10mu;g/mL的一级储备液。
5.2 混合溶液的配制
混合液A：甲醇混合溶液：取苯丙胺-D5，甲基苯丙胺-D5，MDA-D5，MDMA-D5，苯甲酰爱康宁-D3，吗啡-D3，氯胺酮-D4，去甲氯胺酮-D4，可待因-D6一级储备液各1mL混合加入20 mL容量瓶中，甲醇稀释至刻度，得含各待测物500 ng/mL的甲醇混合溶液。
混合液B：乙腈混合溶液：取甲卡西酮-D3，6-MAM-D3，可卡因-D3一级储备液各1 mL混合加入20 mL容量瓶中，乙腈稀释至刻度，得含各待测物500 ng/mL的乙腈混合液。
溶液C：取6-MAM，甲基苯丙胺，吗啡，MDMA，MDA，甲卡西酮，氯胺酮，可卡因一级储备液0.25 mL，苯丙胺一级储备液0.625mL，甲酰爱康宁，去甲氯胺酮，可待因，可替宁一级储备液0.5 mL，混合后加入20mL容量瓶中，甲醇稀释至刻度，得含各待测物2.5mu;g/mL（苯丙胺6.25mu;g/mL）的混合标准溶液。
溶液D：可替宁-D3内标溶液：取100mu;L 可替宁-D3一级储备液于20 mL容量瓶中，甲醇稀释至刻度，得500 ng/mL可替宁-D3内标溶液。
溶液E：工作内标溶液：取溶液A和溶液B各1 mL，混合加入20 mL容量瓶中，甲醇稀释至刻度，得25 ng/mL的工作内标溶液。
5.3 样品预处理
所取水样用盐酸调pH 值到2，－20℃条件下冷冻保存，待分析时先融化，然后进行分析。分析前所有水样经GE Whatman无粘合剂玻璃纤维滤纸GF/CTM过滤去除固体颗粒物，过滤后的样品取100 mL，分别加入200mu;L溶液D，200mu;L溶液E，充分振摇混合均匀，分装为两份，每份50 mL。
5.4 固相萃取
选用Waters Prime MCX固相萃取柱进行操作。50 mL污水或地表水样品以4 mL/min的速度过柱上样；上样完成后先用4mL甲醇淋洗；最后用4 mL 5%的氨水/乙腈溶液洗脱（流速1 mL/min）；50℃条件下在真空旋转浓缩仪中挥至剩余约20mu;L，用80mu;L0.1%甲酸-水溶液复溶，涡旋3 min；4℃，13000 rpm 条件下离心取上清进UPLC-MS/MS分析。[2]
六、工作计划
2月2日—3月22日：完成文献查阅、开题报告等前期工作。
3月22日—5月10日：进行方法学验证的实验。
5月10日—5月20日：完成毕业论文的撰写工作。
5月20日—5月30日：完成毕业论文的评阅与修改工作。
5月31日—答辩前：完成毕业论文的校对等工作。
[参考文献]
[1]王波,杜然,王传凯,王元凤.环境污水毒品检测技术在禁毒情报中的应用[J].中国法医学杂志,2018,33(06):613-617.
[2] David R. Baker, LeonBarron, Barbara Kasprzyk-Hordern. Illicit and pharmaceutical drug consumption estimated via wastewateranalysis. Part A: Chemical analysis and drug use estimates.
开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、课题背景
21 世纪以来，全球毒潮泛滥，毒品问题日趋严重。毒品来源多元化、毒品滥用多样化、制贩吸毒一体化的趋势更加明显，毒品问题已成为我国乃至全球性的社会顽疾。据《2016 中国禁毒报告》显示，截至 2016 年底，全国共有吸毒人员 250.5 万名，其中新发现吸毒人员 44.5 万名，且吸毒人员低龄化特征明显。
为应对如此严峻的禁毒形势，我国毒品案件侦查工作正由信息主导向情报主导转变。通过综合搜集、分析和使用各种情报信息，引导警务决策和资源分配，从而实现禁毒行动的主动预防和精确打击。在新的形势下，情报是毒品犯罪案件侦查的起点和灵魂。然而与此同时，涉毒人员的反侦查意识和能力在不断增强，涉毒活动日趋智能和隐蔽，传统的情报搜集方法如人力搜集、公开搜集等已经难以完全适应禁毒工作对于情报的需求。因此，随着科技的进步，越来越多的新的科学技术手段正逐渐被应用于禁毒工作中的情报收集。在应用传统理化技术的基础上，色谱、红外、质谱等高精度仪器分析技术也逐渐被应用于禁毒工作中，由此获得的情报为打击犯罪提供了强有力的证据。环境污水毒品检测技术所提供的情报信息是禁毒情报工作需求与科学技术手段发展相契合的典型例证。[1]
- 要解决的问题
污水中毒品的测定方法已经基本完善，对方法进行方法学验证
