利用秀丽隐杆线虫模型评价多肽RV的安全性文献综述

 2022-12-28 10:06:02

一.前景及意义

随着我国乃至世界人口老龄化的加剧,衰老带来的一系列健康、医疗和社会问题已逐渐突显出来,因此,研究并发现具有抗衰老的功能物质是应对衰老及其相关疾病的重要途径。总结近年来研究人员在抗衰老药物研究领域的发现,抗衰老药物大致可分为中药类(如当归、人参和蜂王浆等)、小分子类(如二甲双胍、白藜芦醇、原花青素和雷帕霉素)和多肽类(如大米多肽、大豆多肽和人工合成多肽),而活性生物多肽具有抗氧化、抗衰老、清除自由基等多种生理功能,已经广泛应用于食品、医药和化妆品等领域。生物活性多肽大都具备对人体有益的生物学特性,且具有易吸收、生物利用度高和显著的生物学功能的优点,是极具发展前景的功能因子。

同时,在研究衰老和衰老相关疾病这个领域中,秀丽隐杆线虫是一种非常有用的模式生物。因为线虫的衰老是非常保守的,并且和人类的衰老表现非常的相似,包括运动能力下降,认知能力下降,免疫衰老,摄食减少,有害代谢产物比如褐脂质的积累等。并且秀丽隐杆线虫具有结构简单,生命周期短易培养,全身透明易观察,后代数目多易统计分析,基因组容量小且图谱清晰,与人类基因组相似度达60%-80%,实验操作简单方便等优点,因此被选为国际上研究衰老领域中的主要模式生物。因此,利用秀丽隐杆线虫模型观察多肽RV对线虫生长发育和生殖能力的影响,评价多肽的安全性。

二.研究方法

实验采用秀丽隐杆线虫作为实验动物模型,秀丽隐杆线虫从L4期幼虫到成虫死亡只有2–3 周的时间,生命周期短,具有体型小、结构简单、周身透明、生存周期短、产卵量大、神经系统结构简单、易于在实验室培养,遗传信息清晰等特征,使得秀丽隐杆线虫成为一种模式生物。首先将线虫同期化,得同期化L1 期幼虫。准备含有多肽的NGM(nematode growth medium,NGM)固态培养皿,接种大肠埃希氏菌OP50株,大肠杆菌OP50是尿嘧啶缺失突变型,作为秀丽隐杆线虫的食物。待长出菌苔后,将秀丽隐杆线虫接种到平板中,在20℃培养箱中培养。将同期化培养得到的L1期秀丽隐杆线虫培养在含有浓度为0nM,10nM,100nM和1000nM的多肽RV培养基中。在L4期滴加叠氮化钠测定不同实验组线虫的体长和体宽,,以此确定多肽RV对线虫生长发育的影响。培养线虫至可以产卵后,每二十四小时将线虫挑出,转移至新的NGM培养基上,含有虫卵的旧平板继续在培养箱中培养。直到线虫排卵期结束后,对每个平板内的线虫数目进行统计,计算得出每条线虫总的子代数目,每组测定五只线虫,研究多肽对生殖能力的影响。

三.文献综述

游牧在秀丽隐杆线虫在抗衰老领域应用的研究进展中介绍了抗衰老物质的筛选情况,系统综述了作为抗衰老物质筛选评价的生理指标和反映抗衰老机制的生化指标,证明秀丽线虫对抗衰老物质的筛选和抗衰老机制的研究的重要作用。

马晓丽、李娇崔、晓东李、玉英、王转花在芝麻粕多肽活性物质的分离及其抗衰老作用研究中以秀丽隐杆线虫为研究对象,分别研究了不同浓度芝麻柏小肽对线虫的寿命、咽抽速率、运动能力等的影响,证实芝麻粕多肽对秀丽隐杆线虫的抗衰老作用。

顾闻、陈川在基于秀丽隐杆线虫的中医药抗衰老研究中,基于秀丽隐杆线虫模型,指出中医药可从调控衰老基因、调节氧化应激水平、抑制Abeta;1-42 沉积等方面抗衰老及治疗衰老相关疾病。

杨再昌,杨小生在秀丽隐杆线虫在药物筛选中的应用中,介绍用秀丽隐杆线虫筛选的几种药物及方法,表明用秀丽隐杆线虫做体内筛选的优越性。

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