基于LC-MS的活性氧测定方法的建立与应用文献综述

课题名称 基于LC-MS的活性氧测定方法的建立与应用课题性质 radic;基础研究应用课题 设计型 调研综述 理论研究开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）一．研究目的超氧阴离子自由基（O2-）是生物体酶系统产生的含量最高的几种自由基之一，并且具有极高的氧化活性。

作为活性氧的一种，在维持生物体的生理功能方面发挥着重要的作用。

高于正常水平的超氧阴离子自由基会损伤蛋白质、DNA等生物分子，进而导致疾病。

因此，超氧阴离子自由基的高选择性、高灵敏度检测研究对疾病的预防、诊断和治疗均具有重要意义。

目前广泛应用的细胞及组织内超氧阴离子检测方法为以二氢乙锭（HE）作为探针的荧光测定方法。

此方法取得的测定结果已被证明不可靠。

本课题在荧光法的基础上，基于液质联用技术，旨在建立检测细胞内超氧阴离子自由基（O2-）的相对定量方法。

二．研究手段向细胞内加入超氧阴离子探针后，使用反复冻融的方法破碎细胞，获取细胞内容物，经过一系列样品预处理得到质谱样品。

使用LC-MS检测样品内超氧阴离子自由基氧化二氢乙锭分子探针的专属性产物2-OH-E 水平，并使用BCA法与内标物质对结果进行校正，最终计算得到细胞内超氧阴离子自由基水平。

三．研究内容1.建立过量产生超氧阴离子的病理细胞模型2.建立可靠可重复的细胞样品处理方法，得到合格的质谱样品。