巫山淫羊藿活性物质组的制备及解析
一、研究内容
巫山淫羊藿Epimedium wushanenseT.S.Ying是药典记载淫羊藿目前药用的主流品种之一，但是目前关于巫山淫羊藿活性物质组的研究非常少，进而限制了其进一步的开发和利用，本课题将围绕巫山淫羊藿中的黄酮类物质展开研究利用UPLC-QTOF/MS法快速有效地鉴定巫山淫羊藿中黄酮类成分，以期制备巫山淫羊藿的活性物质组，并进行系统解析,为此类中药的临床研究及应用提供更多的实验依据。
二、研究计划
1.供试品溶液的制备
取淫羊藿药材10 g，60%乙醇200 mL超声提取2次，每次30 min，合并提取液，50 ℃旋蒸浓缩至稠膏状，干燥成粉末。精密称取上述粉末50 mg，置100mL量瓶中，加70%乙醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.22 mu;m）滤过，取续滤液，即得。
2.色谱条件
Acquity UPLC BEH C18 色谱柱（100 mm2.1mm，1.7 mu;m），流动相为0.1%甲酸水溶液（A）乙腈（B），梯度洗脱，0～2 min，2%B；2～5 min，5%～60%B；5～8 min，60%～45%B；8～9 min，45%～85%B；9～10 min，85%～95%B；体积流量为0.4mL/min；柱温为45 ℃；进样量为2 mu;L。
3.质谱条件
采用负离子模式；毛细管电压为2.5 kV；锥孔电压分别为30 V；离子源和脱溶剂气温度分别为110、400 ℃；脱溶剂氮气和锥孔气体积流量分别为800、50 L/h；采样频率为0.1 s，间隔0.02 s；监测范围为50～1000（m/z），采用亮氨酸脑啡肽（[M＋H]＋＝556.277 1，[M－H]－＝554.261 5）对其进行实时校正。数据采集模式采用MSE-模式，碰撞能量分别采用20、30、40、50 eV。
