全人源抗体库的构建以及叶酸受体α抗体的筛选文献综述

抗叶酸受体alpha;单链抗体的筛选与鉴定

课题背景：

1叶酸受体alpha;研究

叶酸参与细胞代谢、DNA合成与复制、细胞分裂生长，是细胞生长必需的维生素之一。细胞摄入叶酸有着两种不同的功能系统：①还原叶酸载体(RFC)，其采用一种双向阴离子交换机制将叶酸转运到细胞浆中。RFC存在于所有细胞中，但对叶酸的亲和力较低。②细胞膜连接的叶酸受体(FR)，FR为一类跨膜单链糖蛋白，通过一种糖基化的磷脂酰肌醇( GIP) 与细胞表面连接，并且通过受体介导的内吞作用来吸收叶酸。叶酸受体可分为3 种亚型： FRalpha;、FRbeta; 和FRgamma;，在生理状态下，这几种异构体以不同的水平表达于不同的组织或细胞系中。

叶酸受体中研究最为深入的是叶酸受体alpha;( FRalpha;)，FRalpha;分子量为38KD，对叶酸具有高度亲和性。在生理情况下，FRalpha;仅低度表达于少数正常组织细胞，而在多种人类上皮源性肿瘤中，都可以检测到高水平表达的FRalpha;。但因组织起源不同，肿瘤中的FRalpha;表达亦有所不同。如上皮性起源的肿瘤，乳腺癌、肺癌、结肠癌及肾癌中20%-50%有FRalpha;的高表达； 卵巢上皮癌及子宫内膜癌中则有90%以上可见FRalpha;的高表达[8,9]。FRalpha;在恶变组织中的表达水平通常高于正常20倍，尤其在卵巢肿瘤中可高于正常80-90倍。

鉴于叶酸受体alpha;在正常组织中分布极少，而在卵巢肿瘤细胞中有大量表达，而且对卵巢肿瘤具有高度特异性，因此，叶酸受体alpha;被认为是一种极具潜力的卵巢癌相关性的肿瘤抗原，可以作为卵巢肿瘤的诊断标志物，以及卵巢肿瘤免疫治疗的靶点。

2叶酸受体alpha;与卵巢肿瘤的早期诊断

叶酸受体alpha;对卵巢癌具有高度的特异性，更为重要的是，其对早期卵巢癌有很高的阳性率。FR alpha;的过度表达情况与肿瘤临床分期、病理分级、病理类型、细胞倍体型及S期细胞百分比密切相关，并且表达水平随肿瘤病程进展及恶性程度的加重而提高，显示出FR alpha;对卵巢肿瘤具有较高的灵敏度和良好的特异性。

因此，叶酸受体alpha;对卵巢肿瘤的诊断，尤其是早期卵巢癌的诊断有重要价值。

3单链噬菌体展示抗体库