重酒石酸卡巴拉汀的生物等效性研究
一、研究背景
随着社会人口的老龄化, 阿尔茨海默病(Alzheimer sdisease, AD)的发病率逐年上升, 成为影响老年人生活质量的主要因素, 有效防治AD已是人们普遍关注的课题。尽管AD的病因和发病机制尚未阐明, 但目前已公认AD患者脑内胆碱能功能的减退是导致认知功能障碍的重要生化机制。卡巴拉汀是一种氨基甲酸类的可逆性胆碱酯酶抑制剂，通过与乙酰胆碱酯酶结合成共价复合物而使后者暂时失活，抑制乙酰胆碱的降解，促进胆碱能神经传导，广泛用于轻中度阿尔兹海默型痴呆症状的治疗。目前有关研究认为，胆碱能递质的改变在阿尔茨海默病进程中起重要作用，乙酰胆碱酯酶抑制剂可以改善颅内乙酰胆碱活性。生物等效性是指同一种药物的不同制剂在相同实验条件下，给予相同的剂量，其吸收速度和程度没有明显的差异。生物等效性是仿制药品申请的基础。建立生物等效性的目的是证明仿制药品和一个参比药品生物等效，以桥接与参比药品相关的临床前试验和临床试验。仿制药品当前的定义是与参比药品具有相同定性和定量活性物质组成，以及药剂学形式相同，并且其与参比药品的生物等效性已经被适当的生物利用度试验所证明。生物等效性实验在新药开发和新药评价过程中发挥着非常重要的作用。在开发已经临床证实疗效和安全性的已上市药物的新剂型，证明新剂型与原剂型是否生物等效；在创新药专利过期后，开发其仿制药物，证明仿制药物与创新药物是否具有等同的有效性和安全性；另外，在新药获准上市后其制剂包括处方和工艺又经过大幅度改变情况下，在所有这些情况下，通常均不需要重复临床试验区确认实验制剂的安全性和有效性，只需进行生物等效性试验，通过比较受试药品与参比药品药动学参数的等同性，推断两种药品将产生类似的治疗效果。生物等效性研究的目标是要证实等量同种药物的两种制剂生物利用度完全相同，最终使得在替换使用相关的两种制剂时具有相同的有效性和安全性。
二、研究方法
1）血浆样品处理方法：
精密吸取水杨酸毒扁豆碱溶液10mu;L、血浆0.50 mL置2 mL聚塑离心管中，涡旋30s，（在标准曲线与质控样品制备时加入相应标准溶液50L），内标溶液50 L，PH7.4缓冲液100L，涡旋30s后，加入甲基叔丁基醚-二氯甲烷(2:1，v/v)1mL，涡旋2min后，冷冻离心机15800r/min高速离心10 min，分取上清液置2 mL聚塑离心管中，再加入1%酒石酸甲醇20mu;L，振荡摇匀，35℃减压挥干，残渣加复溶液(50%流动相A - 50%流动相B) 150mu;L，涡旋3min，15800 rpm离心10 min，分取上清液，20mu;L进样测定。
2）色谱条件
色谱柱：hitachi-C18(150 mm4.6 mm, 5 mm)；
柱温：35 ℃；
