1.选题的目的及研究意义
本实验是基于天然药物化学香豆素类的化合物的合成。由酪氨酸高产菌株生产香豆素类化合物。为了实现大量的合成，大肠杆菌酪氨酸代谢途径的优化就成关键的原料准备环节。L-酪氨酸属于芳香氨基酸,广泛应用于食品、医药以及化工等领域。由于天然微生物合成积累L-酪氨酸的能力很低,近几年利用代谢工程的方法进行途径改造和全局代谢途径优化取得了显著成效。解除反馈抑制、增加前体供应、阻断竞争途径以及调控转运等代谢改造策略非常有效地提高了L-酪氨酸的产量。目前来看，用发酵法来大量的生产酪氨酸是比较可行的途径。这样一来大肠杆菌络氨酸代谢途径优化就成了发酵法提高酪氨酸产量的一个非常重要的因素。这样可以从源头提高酪氨酸的产量降低工业化生产的成本，而且所产的酪氨酸都是天然微生物发酵所得。
2.拟研究或解决的问题
2.1实现关键基因的异源表达
2.2实现限速步骤的反馈抑制现象的解除
2.3对酪氨酸代谢途径进行整合，实现多基因共表达策略
2.4多基因共表达重组质粒的构建
2.5质粒稳定性的研究
2.6表达条件的优化
2.7酪氨酸含量测定方法建立
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