荷载药物的中性粒细胞的制备文献综述

开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）

目前，癌症在全世界已成了导致人类死亡的第二大原因。寻找有效的抗癌药物与方法，彻底攻克癌症，是医学界重要的研究课题。近几年来，抗肿瘤的药物发展十分迅速。肿瘤的药物治疗主要包括化疗药物、中药、生物制品、基因药物和肿瘤靶向治疗。虽然肿瘤治疗的药物很多种，但仍然以化疗药物为主。在化学类抗肿瘤药治疗中，肿瘤化疗取得了相当的进步，肿瘤患者生存时间明显延长。化学类抗肿瘤药是指作用于DNA化学结构的药物，属于细胞毒类药。卡莫司汀(BCNU) 是常规化疗药物之一，临床有广泛用途^[1]。

卡莫司汀具有高脂溶性、相对分子质量小、血浆蛋白结合率低等优点，可以迅速通过血脑屏障，被认为是颅内胶质瘤化疗的金标准^[2]，临床上可用于治疗脑瘤(恶性胶质细胞瘤、脑干胶质瘤、成神经管细胞瘤、星形胶质细胞瘤、室管膜瘤)、脑转移瘤和脑膜白血病等多种疾病，对何杰金氏病和急性白血病有较好的疗效，对乳腺癌、肺癌、脑瘤和癌的骨转移等也有一定疗效。现在药物发展完善迅速，由于卡莫司汀血浆半衰期较短，只有15～20min，给药后24h，血药浓度几乎为0，肿瘤局部不能达到有效的作用浓度和时间^[3-4]，许多学者希望通过改进卡莫司汀的制剂形式及给药方式，使其能够在肿瘤及周边达到较高药物作用浓度及较长的作用时间。

脂质体（liposome）是一种人工膜。在水中磷脂分子亲水头部插入水中，脂质体疏水尾部伸向空气，搅动后形成双层脂分子的球形脂质体，直径25～1000nm不等。脂质体可用于转基因，或制备的药物，利用脂质体可以和细胞膜融合的特点，将药物送入细胞内部。按照脂质体所带电荷分类，可以分为中性脂质体、阴离子脂质体、阳离子脂质体^[5]。其中，阳离子脂质体相比另两种，具有以下一些优点^[6]：

(1)阳离子脂质体因为其表面带正电荷，所以对带负电的药物有较强的电荷吸引作用，该作用使得药物容易进入到脂质体的内水相。另一方面，由于静电引力作用，药物从脂质体中泄露速率慢，包封率高，载药性能好^[7]。

(2)脂质体表面都带正电荷，所以互相排斥，可以将粒径变化减小到最低程度，有效防止脂质体聚集。有文献报道，加入10～30%带电荷脂质即可防止脂质体聚集^[8]。

(3)磷脂中不饱和酰基键极易被氧化，一些有机溶剂和辐射等因素还能加快其氧化，降低稳定性。而正电脂质体能有效的降低磷脂被氧化的速度^[9]。

(4)一般来说，由于细胞膜表面带负电，细胞对阳离子脂质体的摄取远大于中性和带负电的脂质体，所以肿瘤细胞对荷载药物的阳离子脂质体摄取增加，对细胞的杀伤力增大。

实验室常用的制备脂质体方法为薄膜分散法，即将脂质体材料溶于氯仿，旋蒸成膜，并抽真空完全除溶剂，最后加入配制好的药物溶液水合，超声即可得到包载药物的阳离子脂质体^[10]。

目前，抗肿瘤药物的体外抑制试验方法有许多种，包括3H-Tdr（3H-Thymidine，三氢胸腺嘧啶核苷）掺入法、MTT（四唑盐）比色法、SRB 显色法（SulforhodanimeB, 硫化罗丹明法)等^[11]。其中MTT比色法简便、灵敏、快速、经济、不使用同位素，研究结果稳定，重复性好，是目前应用较广的一种方法。