蛇毒类凝血酶的制备工艺和质量分析文献综述

 2023-01-31 10:01

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

一、研究内容

1.粗毒的制备

尖吻蝮蛇,采用咬皿挤压法[v]收集蛇毒,毒液冷冻干燥,冻干后的蛇毒呈微黄色粉末状,于一20OC储存备用。

2. 尖吻蝮蛇类凝血酶的分离纯化

应用凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析,结合SDS一聚丙烯酞胺凝胶电泳以及相应的检测方法,分离纯化出一种类凝血酶。

3. 尖吻蝮蛇毒类凝血酶的性质研究

应用SDS一Page凝胶电泳(还原和非还原条件)测定TA一2的分子量大小与亚基组成;测定该组分酶活力以及不同条件(浓度、作用时间、温度、PH、离子、抑制剂)对其水解纤维蛋白原活性的影响;测定TA一2的糖含量,以及对血小板聚集的影响、

二、实验路线

野外采蛇 咬皿挤压法收集蛇毒 冷冻干燥,一20℃冻干备用 分离纯化:sephadexG一100、DEAE-SePhadexA-25、Sepharose一肝素亲和层析三步色谱法

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