蛋白巯基亚硝化探针的设计、合成及反应活性研究文献综述

一氧化氮（NO）是生理过程中重要的细胞信使之一，参与调节多种细胞活动，包括血管扩张，抑制血小板聚集，神经传递和抗微生物等。

根据底物、NO浓度和暴露时间的不同，NO可以通过不同的方式发出信号。

经典的NO途径涉及鸟苷酸环化酶和环磷酸鸟苷（cGMP）的生成；非经典途径包括NO参与的蛋白质翻译后修饰（PTM）[1]。

其中蛋白巯基亚硝化（S-nitrosylation,SNO）是基于NO信号传导的一种重要的PTM，通过NO对半胱氨酸硫醇进行可逆的[2]氧化修饰生成亚硝基硫醇（RSNO）来调节蛋白质生物活性，影响酶活性、蛋白质定位和蛋白质-蛋白质相互作用等[3]。

相关研究表明，SNO与心血管疾病[4]、阿尔兹海默病[5]、衰老[6]相关，且参与细胞死亡信号传导并产生抗凋亡作用[7]。

对SNO的高特异性检测方法研究对深入揭示NO供体药物作用的分子机制具有重要意义。

现有的SNO检测方法大致分为两类：间接检测法和直接检测法。

间接检测法断开S-N键，捕获硫或者氮的部分进行定量检测；直接检测法有选择性地靶向SNO并产生相应的信号或者标记来进行检测。

现有的间接检测方法主要有：1、生物素转化法（biotin switch technique,BST）：BST的基本步骤为：①用碘乙酰胺（IAA）或者甲基硫代磺酸甲酯（MMTS）阻断所有游离的半胱氨酸硫醇；②用还原性物质比如抗坏血酸盐还原RSNOs；③用生物素标记物对新生成的硫醇进行原位标记，通过Pull-down或者Western blotting等方法富集分析[8]。