开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
1.拟研究或解决的问题:
由于广州地铁站检测出了超级细菌，所以超级细菌是否也存在于雾霾之中是一个值得研究的课题。我的实验课题是雾霾中细菌分离及耐药性研究。目的为了分离出在雾霾和大气中存在的微生物，对分离出的微生物进行鉴别、耐药性测试等试验。
2.采用的手段
收集雾霾和大气中存在的微生物
试验方法：自然沉降法
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药品名称 |
重量 |
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酵母浸粉 |
0.5 g |
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NaCl |
0.5 g |
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琼脂 |
1.5 g |
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水 |
100ml |
⑴固体培养基的配置（100ml）
⑵灭菌：灭菌条件121℃ 30min。灭菌后将平板放入烘箱，固体培养基放入60℃水浴锅保温。
⑶倒平板：将已灭菌的平板和培养基放置在超净台中，用紫外线照射30分钟。在无菌条 下倒平板6个，静置冷却。
⑷收集微生物：采用五点法收集微生物，将5个平板开盖放置在大气中，并且留一个平板作为对照。
细菌分离、斜面保藏
（1）固体培养基的配置（同上）
（2）制作斜面培养基：平均分装在试管后灭菌。拿出已灭菌的含有培养基的试管，成30角摆放。冷却。
（3）在超净台中，用接种环挑选单菌落，接种在斜面上。放入37℃恒温培养箱中培养。
（4）将培养好的斜面用记号笔标记，放入4℃冰箱总保藏。
细菌鉴别
方法：用革兰染色法鉴别细菌。
（1）制作涂片（超净台中）：接种环挑斜面上的细菌，涂在在载玻片上，向载玻片中滴入一滴生理盐水，均匀涂开，晾干。在酒精灯上缓慢过3下，固定细菌。
（2）初染，结晶紫滴在载玻片上，染色1-2min，用细水冲洗。
媒染，用卢哥碘液滴到载玻片上1min，用细水冲洗。
脱色，用95%的乙醇脱色30s。
复染，用复红复染1min。
（3）用显微镜观察，记录观察结果。
耐药性测试
方法：滤纸片法
（1）购买10种常见抗生素的滤纸片，例如：红霉素、青霉素、庆大霉素等。
（2）固体培养基的配置（同上）。
（3）灭菌：灭菌条件121℃ 30min。灭菌后将平板放入烘箱，固体培养基放入60℃水浴锅保温。
（4）倒平板：将已灭菌的平板和培养基放置在超净台中，用紫外线照射30分钟。在无菌条 下倒平板6个，静置冷却。
（5）在无菌的条件下，在无菌条件下,将制备好的菌悬液密划于琼脂平皿上,力求均匀一致 ,稍干后,以无菌小摄子夹取各种抗菌素干燥滤抵片,贴在琼脂平皿表面,通常每个琼脂平皿同时可贴5一6片,抵片的简距应在2厘米以上,放置37℃中培养箱中14一18小时后取出,量其抑菌圈直径,按规定记录。
3.文献综述:
雾霾在我国是一个环境难题。因其颗粒小，数量多，穿透性强，雾霾成为了威胁人体健康的主要因素。然而除了雾霾本身的危害之外，其中还夹杂着不少微生物。研究发现，微生物温度适应能力强，在水分蒸发进入大气，随空气温度降低会再次凝结，冬季成霜，春季成雾。物体悬浮状态接触空气面积最大，使吸附在凝结核表面的微生物获得充分氧气，所以雾霾可以提供微生物生长的必要条件，即温度、水分、氧气和养分。清华大学的科学工作者研究了2013年1月北京严重雾霾期间颗粒物中的微生物，指出北京雾霾中大约有1300 种不同类型的微生物。
文献参考：1.方治国，郝翠梅，姚文冲，欧阳志云．空气微生物群落解析方法：从培养到非培养[J]．生态学报，２０１６，３６（１４）： ．Ｆａｎｇ Ｚ Ｇ， Ｈａｏ Ｃ Ｍ， Ｙａｏ Ｗ Ｃ， Ｏｕｙａｎｇ Ｚ Ｙ． Ｃｕｌｔｕｒｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ａｎｄ ｃｕｌｔｕｒｅｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｆｏｒ ｓｔｕｄｙｉｎｇ ａｉｒｂｏｒｎｅ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ． Ａｃｔａ
2.刘继正，陈书宝，用干燥滤纸片法测定细菌对联合抗菌素敏感试验的初步报告[J]：天津医药杂志7（2）：178-181,1965.
3.爱红，快速制作斜面培养基方法[J]，实用技术新疆科技报2,2003
4.顾为东，中国雾霾特殊形成机理研究[J]：宏观经济研究6:2-7,2014
5.廖琴,中国学者研究北京雾霾中的微生物[J],地球科学进展29:428,2014
6.任成山，超级细菌 的由来和未来[J]，中华肺部疾病杂志3（5）：378-383，2010
7.王豫林，陈代鸿，空气中微生物采样方法的比较[J],microbiol8:277-279,1989
8.肖辉川，微生物在不同培养基上生长情况的研究[J]，实用医技杂志13（10）：1638-1640,2006
9.黄元桐, 崔杰. 革兰氏染色三步法与质量控制[J]. 微生物学报36(1):76-79., 1996
开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
1.拟研究或解决的问题:
由于广州地铁站检测出了超级细菌，所以超级细菌是否也存在于雾霾之中是一个值得研究的课题。我的实验课题是雾霾中细菌分离及耐药性研究。目的为了分离出在雾霾和大气中存在的微生物，对分离出的微生物进行鉴别、耐药性测试等试验。
2.采用的手段
收集雾霾和大气中存在的微生物
试验方法：自然沉降法
