课题背景：
乳腺癌是一类常见的恶性肿瘤，多发于女性，罕见于男性。在2018年全球新发癌症病例中，女性乳腺癌占11.6%，排名第二；而在死亡病例中，女性乳腺癌占6.6%，位居第五，是女性发病率、死亡率最高的癌症。在多种因素的影响下，近年来我国女性乳腺癌的发病率和死亡率有着明显的上升。尽管乳腺癌治疗效果较好，目前仍有大约40%的乳腺癌患者在接受系统性治疗后出现复发和转移，且大多数患者因此死亡。
肿瘤转移是一个多因素、多环节的复杂过程, 包括肿瘤的局部浸润、细胞外间质(extracellular matrix, ECM)降解、进入血液循环并且在新的部位种植生存。在此过程中，尿激酶型纤溶酶原激活物 (urokinase-type plasminogen，uPA)系统作为重要的蛋白水解酶系统在肿瘤的侵袭和转移中发挥重要调节作用。PAI-1是uPA系统的抑制剂，但在乳腺癌组织中uPA、纤溶酶原激活物抑制剂-1（Plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1）表达成正相关。uPA、PAI-1表达强度越高, 发生远处转移的可能性越大, 患者的预后越差。
PAI-1通过多种途径影响肿瘤的迁移，包括促进血管生成、调节细胞黏附等。DT-13具有抗乳腺癌的选择性，且能够抑制肿瘤血管生成和缺氧诱导的细胞侵袭，因此，DT-13可能对PAI-1介导的生理途径有针对性抑制作用。
课题内容：
通过细胞活力测定、集落形成测定、细胞凋亡测定、蛋白质印记分析、transwell实验、细胞划痕实验等方法，对DT-13通过抑制PAI-1抗乳腺癌转移的作用强度、时间、剂量关系及其危害性等进行研究，并将之与国内外已有的抗乳腺癌转移药物进行对比，寻求优于手术的抗乳腺癌转移方案。
拟设置实验具体流程如下：
乳腺癌细胞培养→培养细胞活力测定→加入阳性药、实验药（DT-13）、溶剂及空白对照→①细胞活力测定②集落形成测定③细胞凋亡测定④蛋白质印记分析⑤免疫组化分析⑥transwell实验⑦细胞划痕实验→对数据进行统计分析→结论
课题意义：
DT-13有着较明确的抗肿瘤转移作用。但在其可能的抗肿瘤转移作用机制中，暂时没有对uPA和PAI-1的研究，而PAI-1对肿瘤转移有着重要的调节作用。本课题针对DT-13在PAI-1调控的肿瘤转移作用中所起的作用进行研究，弥补DT-13抗肿瘤转移机制的不全面之处，探究DT-13可能作用的信号通路和靶点，增加了DT-13临床应用的可能性。
