1. 研究目的与意义
板蓝根为传统中药,来源于十字花科植物菘蓝的干燥根,具有清热解毒,凉血利咽的功效, 用于温毒发斑、舌绛紫暗、痄腮、烂喉丹痧、大头瘟疫、丹毒、痈肿等症。
板蓝根是清热解毒类中药代表药物,抗炎作用是板蓝根发挥清热解毒作用中非常重要的一个环节,但是目前对于板蓝根中抗炎作用物质基础的研究依然仅限于总提取物或混合部位层面,还不能确定具体是哪种/类成分发挥抗炎作用。
细胞萃取法是一种细胞色谱法,原理是利用生物活性物质的特异性相互作用进行生物样品分离分析和生物活性参数测定,通过药物与靶点( 受体、通道、酶等)结合的原理,将药物中的效应物质分离,该类技术具有色谱高效分离分析的优势和以生物活性靶标进行特异筛选的特点,无需分离得到纯品即可快速、高效、简捷地完成活性成分的筛选,因此可利用细胞萃取技术研究板蓝根的抗炎药效物质基础。
2. 文献综述
板蓝根的化学成分及药理活性研究进展刘芙蓉摘要:板蓝根为十字花科菘蓝属植物菘蓝(isatis indigotica frot.)的干燥根,原产我国,分布于江苏、浙江、福建、河南、广西、台湾等地,全国各地均有栽培。
本品味苦性寒,归心、肝、胃经,具有清热、解毒、凉血、利咽之功效,临床上常用于治疗瘟毒发斑、高热头痛、大头瘟疫、烂喉丹疹、喉痹、疮肿、水痘、麻疹、肝炎、流行性感冒等病症。
其主要产品有板蓝根颗粒冲剂,随着国际上应用天然药物的热潮,板蓝根的药理活性及其有效成分得到了深入的研究,并引起了国内外学者的广泛关注,本文就有关板蓝根化学成分、药理活性的最新研究进展综述如下。
3. 设计方案和技术路线
1基于细胞萃取技术的板蓝根抗炎物质基础研究取上板蓝根提取液1 ml,以dmem培养液稀释至5 ml,加入raw264.7细胞中,再加入dmem培养液至20 ml,置于细胞培养瓶中,37 ℃,5%co2,相对湿度95%的培养箱中培养1.5 h。
将培养后的细胞加入20 ml d-hanks 缓冲液并用吸管轻轻吹打,洗涤,离心(1 000 rmin-1,10 min)弃去上清液,如上操作共洗涤6 次直至洗涤液无保留峰。
将洗涤后的raw264.7细胞加入ph 4.0 的d-hanks 缓冲液,37 ℃,5% co2,相对湿度95%的培养箱中培养1 h,使细胞上的靶点失活,将结合的药物释放出来。
4. 工作计划
2.21-2.27 查阅并整理文献资料2.27-3.11 完成开题报告3.11-5.31 进行课题实验5.01-5.30 完成毕业论文设计
5. 难点与创新点
本项目遵循中药研究的多组分、多途径、多靶点原则,应用细胞萃取技术、代谢组学技术对板蓝根抗炎的物质基础及作用机制进行探讨。
深层次探究板蓝根多组分、多途径抗炎的作用机制,明确板蓝根抗炎的细胞代谢通路,揭示板蓝根抗炎作用的物质基础。
本项目为板蓝根抗炎的研究提供新线索,为多视角揭示板蓝根抗炎作用机制提供科学依据,具有较好的中医药理论研究思路和实际应用指导意义。
