阿德福韦酯有关物质的测定及方法学验证文献综述

开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、文献综述及采用的研究手段，不少于2000字）

1. 选题的目的及研究意义

阿德福韦酷是由美国GileadScienee公司开发的新型第二代核普类抗乙型病毒性肝炎药物。它是腺嘌呤磷酸酯化合物阿德福韦的前药,分子量为501.48。口服后,在体内转化为阿德福韦发挥抗病毒作用。美国FDA于2002年l1月批准其用于乙型肝炎的治疗，其长期使用疗效稳定、病毒变异率低，在一定程度上减小了第一代核苷类药物诱发的病毒变异给医生带来的困扰。我国SFDA自2005年起批准了多家片剂和胶囊剂上市．给患者带来了福音。

阿德福韦酯(adefovir dipivoxil,bis-POMPMEA)是一种核苷类广谱抗病毒药物, 其对乙型肝炎病毒有显著的抑制作用。作为酯类前体药物,阿德福韦酯易发生水解反应，产生阿德福韦单特戊酸甲基酯(mono-POM PMEA,也称阿德福韦单酯)、阿德福韦(PMEA)及N6一羟甲基等物质，降低口服生物利用度。因此,检查及控制其制剂中的水解产物,对控制药品质量十分重要。

为控制药品质量,保证药品的安全性和有效性,准确测定我们所生产的阿德福韦酷片中阿德福韦酷的含量和其它相关杂质含量是必须的。现将阿德福韦酯有关物质检测方法研究进展综述如下。

2. 文献综述

查阅文献，总结出目前可以用来检测阿德福韦酯有关物质的方法

2.1.高相液相色谱法（HPLC）检查阿德福韦酯的有关物质

汪正宇，用反相高效液相色谱，以ODS C8色谱柱(250mm x 46mm，5mu;m)为固定相；流动相：乙腈一磷酸盐缓冲液(pH7.0)=2:3，流速1.0ml/min，检测波长261nm，进样量20mu;l。结果本品在8-8O mg/L的范围内，线性关系良好(r=O．999 9，n=5)，平均回收率分别为99．43％ 、99．37％ 、99．45％ ，最小检测量0.2 ng，有关物质含量低于2.0％。何晓艳等用反相高效液相色谱，以Thermo氨基柱Aps．2 HYPERSIL(250mm4．6 mm，5um)；检测波长260nm；柱温30℃；流动相：磷酸盐缓冲液(磷酸二氧钾3.4 g，加三乙胺5 ml，加水稀释至1 000 ml，用磷酸调节pH至5.0)一乙睛(30：70)；流速1.0 ml/min ；进样量：20mu;l。结果阿德福韦单酯在O.10～l0.08 ug/ml范围内线性关系良好，r=0.999 6，平均回收率为lO1.0％ ，RSD为0.53％(n=9)；PMEA在0.10～10.11 ug/m1 范围内线性关系良好，r=0.999 5，平均回收率为100.7％ ，RSD为1.85％(n=9)。肖戎，用反相高效色谱法，使用Alltech混合式阴离子交换反相C8色谱柱(7mu;m,100A,250mmx4.6mm),流动相梯度为:流动相A(pH=6的200ml的磷酸钾缓冲液:乙睛=70:30)，流动相B(pH=6的200ml的磷酸钾缓冲液:乙睛=50:50)，流速:1.2ml/min,柱温:30℃,检测波长260nm,进样体积:10ul。结果在该检测条件下,空白和辅料对检测均无影响.阿德福韦酷浓度在0.5ug/ml到2.0mg/ml范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999),任何相邻两峰间的分离度均在1.5到20.7之间。回收率在99.5一100.5%之间,RSD为0.2%。武向峰等用反相高效液相色谱法，用Alltech混合式阴离子交换C8柱(7um,250mm x4.6 mm)色谱柱，梯度洗脱，流速 1.2mL/min，检测波长260nm。结果阿德福韦酯在0．05020．5020 mg/mL浓度范围内，线性良好，r=0．9999；最低检测限0．1ug。周采菊等采用Inertsil C8硅烷键合硅胶为填料的色谱柱(250mm4．6 mm，5um)；以乙腈一25 mmol/L 磷酸二氢钾溶液(pH 6．0)(40：60)为流动相，流速1．0ml/min，检测波长为262nm。结果杂质及降解产物能与阿德福韦酯基线分离；浓度在10．28～154．20ug/mL 范同内与峰面积呈良好线性关系，r=1．0000(n=8)；最低检测限为0．04 ng。杨红等; 使用ODSC18色谱柱(200mm4．6mm，5um)，以0.02mol/L磷酸二氢钾(pH6.0)：乙腈(60：40)为流动相，流速1.0ml/min．检测波长254nm。结果含量测定在0．05～0．4ug/ml的浓度范围内呈良好线性关系(r=0．9997)，平均回收率为100．27 %。日间RSD=0．44 %(n=6)。蒋晔等,以Inertsil CN-3化学键合硅胶为固定相,以乙腈-25mmol/L磷酸盐缓冲液(pH4.0)(体积比为33∶67)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长260nm。结果阿德福韦酯、阿德福韦的质量浓度分别为1.861～181.7mg/L和2.018～197.2mg/L时与峰面积呈良好的线性关系(r分别为0.999 9和0.999 8);阿德福韦酯及阿德福韦平均加样回收率分别为99.5%～101.0%和99.1%～99.6%,相对标准偏差(RSD)均低于1.0%,阿德福韦的最小检测量(以信噪比为3计)为1ng。

2.2.胶束电动毛细管色谱法快速测定阿德福韦酯及其有关物质