人重链铁蛋白的克隆、表达及性质研究开题报告

 2021-08-08 14:05:24

1. 研究目的与意义

在无氧的条件下,利用化学上的氧化还原反应,将位于铁蛋白核内部的铁核去除,便得到了脱铁的铁蛋白(ApoFt)。脱铁铁蛋白可以作为载体,将其它的一些矿物质离子加入其中,这样就可以形成新功能型的生物纳米颗粒。本实验主要研究用人H链铁蛋白来装载可溶性紫杉醇。

2. 国内外研究现状分析

已经发现了三种特征铁蛋白:(1)DNA结合铁蛋白(Dps),存在于细菌和古细菌中;(2)细菌铁蛋白(Bfr),广泛存在于细菌中;(3)典型铁蛋白(Ftn),在真核生物(H链)中也有发现。

华东理工大学的黄雅佩、黄培森等人构建了一种具有高度生物安全性的人表皮生长因子-铁蛋白亚基纳米粒子(EGF-5Cys-FTH1),该纳米粒子能有效靶向于过表达的表皮生长因子受体(EGFR)的乳腺癌细胞。由于采用了基因突变增加了蛋白的载药位点,所构建的阿霉素/铁蛋白重链亚基(DOX/EGF-5Cys-FTH1)纳米载药系统显示了较高的载药量。与游离DOX相比,该载药系统相比于对乳腺癌耐DOX的MCF-7/ADR细胞具有更好的致死作用。

3. 研究的基本内容与计划

内容:1. 人h链铁蛋白基因的合成。

2. 人h链铁蛋白的克隆表达。

3. 人h链铁蛋白的性质研究。

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4. 研究创新点

纳米材料的生物相容性差也导致了免疫系统的识别和清除。铁蛋白纳米粒子作为天然蛋白质,生物相容性好,不易引起机体的免疫排斥反应,因此毒性小。研究发现,当细胞病变成肿瘤细胞时,其肿瘤细胞表面的转铁蛋白受体会急速增加。当利用铁蛋白作为载体时,恰巧能够结合肿瘤细胞膜上的转铁蛋白受体,使得这样一种类似于抗原抗体的相互作用成为了铁蛋白作为靶向肿瘤载体的分子基础。因此,如果能够利用铁蛋白壳,在其空腔内组装药物,当它与转铁蛋白受体结合时,就可以实现药物的定向传递,从而避免产生免疫原性的问题。

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