1. 研究目的与意义
本研究内容为获得多孔菌中具有抗氧化、抗衰老活性的组分,为多孔菌资源的利用提供参考依据。
通过对多孔菌活性代谢产物的研究筛选与分析,发现更多新结构类型的活性化合物。开发能被人体吸收和利用的,具有调节各生理功能的,增强机体抵抗力与免疫力的,消除体内自由基,有抗肿瘤、抗衰老作用的活性成分,深人研究利用多孔菌资源,打开更广阔的多孔菌市场。2. 国内外研究现状分析
大量的研究已经证明多孔菌自然资源丰富,易于人工培养,化学成分的结构种类丰富,又具有广泛的生物活性,还可用其作为先导物,开发新的天然药物,是新药研究和开发的一个重要领域。
在多孔菌的抗氧化研究中,Wu等从牛樟芝分离出的抗氧化物质具有DPPH自由基清除活性和较弱的过氧化物抑制作用。Lee等从桦褐孔菌子实体中分离出6种具有抗氧化活性的化合物,这6种化合物有较强的DPPH和ABTS自由基清除能力。Song等发现鲍姆木层孔菌子实体的70%乙醇提取物具有良好清除稳定自由基(DPPH)活性,其对脂质体过氧化物(LPO)抑制作用呈量效关系,对黄嘿吟氧化酶也有显著的抑制作用。鄢嫣等研究表明,黑灵芝子实体水溶性多糖的抗氧化活性为0.376 mmol/g 。郑剑玲等研究表明北虫草培养15 d时,子实体的总SOD活力为63.78 U/mg,液体发酵15 d时期,发酵液总SOD活力为9.21 U/mL 。 陶明煊等测定金顶侧耳、毛头鬼伞和姬菇3种食用菌的粗多糖清除DPPH自由基的IC50值分别为14.5、15.02和15.36 mg/mL;Lillian等测定双孢蘑菇、罗马尼斯蘑菇、林地蘑菇、白林地菇的粗多糖清除DPPH自由基的IC50值分别为9.61、6.22、5.37 和 6.39 mg/mL。Tseng等测得松杉灵芝多糖清除DPPH自由基的IC50值为4.13mg/mL。
在多孔菌69个属中,仅有15个属有过报道,且主要集中于桑黄、樟芝、茯苓、云芝、槐耳等。目前对多孔菌活性代谢产物的研究主要集中在多糖类化合物上,对于小分子研究还较少。通过对多孔菌高通量多靶标活性筛选与化学分析,发现更多新结构类型的活性化合物。总之,多孔菌是一类具有较高药用价值、重要医药应用潜力的真菌类群,其研究和开发具有广阔的前景,有待深人研究。3. 研究的基本内容与计划
研究内容:1.多孔菌活性组分的分离提取
采样生物酶解技术、微波、超声等多种方法对多孔菌进行破碎,利用不同活性功能组分不同的理化性质进行提取,对料液比、提取溶剂、温度、时间等参数进行优化,筛选出最佳粗提工艺,通过层析及大孔树脂技术进行分离纯化,获得水溶、醇溶等系列极性的功能组分。
2.活性功能评价
4. 研究创新点
本实验的研究材料为秀丽线虫。
秀丽线虫成虫体长1mm,身体半透明,以大肠杆菌op50为食饵,生命周期3d;具有神经环和神经节、肠道、肌肉、皮下组织、排泄系统、免疫系统、性腺和子宫;具有完备的发育和解剖学特征和复杂的遗传学特征。
在自然状态下雌雄同体,可以自我繁殖,因此繁殖迅速,这种自我繁殖能力,非常有利于得到具有同一基因结构的纯合体。
